雙層平板法

雙層平板法，又叫雙層瓊脂平板法，先在培養皿中倒入底層固體培養基，凝固後再倒入含有宿主細菌和一定稀釋度噬菌體的半固體培養基。培養一段時間後，計算噬菌斑的數量。

基本信息

• 中文名：雙層平板法

• 方法：雙層瓊脂平板法
• 恆溫培養：30℃恆溫培養6～12h觀察結果
• 觀察結果：雙層培養基的上層出現透亮空斑

操作步驟

雙層瓊脂平板法

1 倒下層瓊脂
融化下層培養基，倒平板（約10mL/皿）待用。
2 倒上層瓊脂
融化上層培養基，待融化的上層培養基冷卻至50℃左右時，每管中加入敏感指示菌 (大腸桿菌) 菌液0.2mL，待檢樣品液或上述噬菌體增殖液0.2～0.5mL，混合後立即倒入上層平板鋪平。
3 恆溫培養
30℃恆溫培養6～12h觀察結果。
4 觀察結果
如有噬菌體，則在雙層培養基的上層出現透亮無菌圓形空斑——噬菌斑