遺傳學重組率
交換值(重組率):指同源染色體的非姊妹染色單體間有關基因的染色體片段發生交換的頻率,一般利用重新組合配子數占總配子數的百分率進行估算。
交換值(%)=(重新組合配子數/總配子數)×100%
交換值的幅度經常變化於0-50%之間:
* 當交換值——>0%,連鎖強度越大,兩個連鎖的非等位基因之間交換越少;
* 交換值——>50%,連鎖強度越小,兩個連鎖的非等位基因之間交換越大。所以,交換值的大小主要與基因間的距離遠近有關。
影響交換值的因子:
1).性別:雄果蠅、雌蠶中未發現染色體片段發生交換;
2).溫度:家蠶第二對染色體上PS-Y(PS黑斑、Y幼蟲黃血)
飼養溫度(℃) 30 28 26 23 19
交換值(%) 21.48 22.34 23.55 24.98 25.86
3).基因位於染色體上的部位:離著絲點越近,其交換值越小,著絲點不發生交換。
4).其它:年齡、染色體畸變等也會影響交換值。
* 由於交換值具有相對穩定性,常以該數值表示兩個基因在同一染色體上的相對距離——遺傳距離。
基因工程學重組率
重組率:連線反應結束後,含有外源DNA片段的重組分子數與加入的載體分子數之比。較為理想的重組率為25-75%
提高重組率的方法:
連線反應條件 外源片段:載體=2:1-10:1(分子數),增加碰撞機會,減少自身環化。
載體除磷 (磷酸酯酶5’除磷)。
TdT在3’端增加人工粘性末端,防止載體自我環化 。