內容簡介
《醫用基因工程(2版)》內容全面、系統,既有新理論,又有新技術、新方法和新進展,方法具體,具有可操作性,實用性強。可供醫學、生物技術和生物製藥專業的教師及研究人員參考,尤其適於用作醫學、生物技術及生物製藥專業的研究生、本科生的教材。
圖書目錄
第一章 核酸的結構與功能,基因及基因工程的概念
第一節 核酸的結構與功能
一、核酸的化學組成
二、DNA的結構與功能
三、RNA的空間結構與功能
第二節 基因和基因工程的概念
一、基因的概念
二、基因組
三、基因工程的定義和研究內容
四、基因工程的發展史
五、基因工程的誕生
複習思考題
第二章 基因工程中常用的工具酶
第一節 限制性核酸內切酶與DNA分子的體外切割
一、限制性核酸內切酶的製備方法
二、限制性核酸內切酶分類和命名
三、Ⅱ型限制性核酸內切酶的基本特性
四、影響限制性核酸內切酶活性的因素
第二節 DNA連線酶和DNA分子的體外連線
一、DNA連線酶
二、DNA分子的體外連線
第三節 其他工具酶
一、大腸桿菌DNA聚合酶I(EColi DNA PolⅠ)
二、DNA聚合酶I大片段(Klenow 酶)
三、T4DNA聚合酶
四、逆轉錄酶
五、末端脫氧核苷醯轉移酶
六、核酸酶Sl
七、核酸酶BAL31
八、外切核酸酶Ⅲ
九、T4多聚核苷酸激酶
十、鹼性磷酸酶
十一、甲基化酶
複習思考題
第三章 基因克隆載體
第一節 質粒載體
一、質粒的基本特性
二、質粒的分離純化方法
三、質粒載體的選擇
四、大腸桿菌質粒載體
五、多種功能的衍生質粒的組建
第二節 噬菌體載體
一、噬菌體的一般生物學特性
二、λ噬菌體載體
三、黏性質粒
四、單鏈DNA噬菌體載體
第三節 真核細胞的克隆載體
一、在酵母細胞中克隆基因常用的載體
二、植物基因克隆的載體——Ti質粒
三、動物細胞基因克隆的載體
複習思考題
第四章 目的基因的分離和克隆
第一節 目的基因的獲得
一、基因的合成
二、建立基因組DNA文庫
三、構建cDNA文庫篩選目的基因
四、其他方法
第二節 獲得目的基因方法的選擇
一、根據獲得目的基因的研究目的選擇方法
二、根據目的基因本身特點選擇方法
三、根據實驗室設備條件選擇方法
第三節 目的基因重組體的構建
一、質粒DNA的分離純化
二、目的基因與載體的連線
複習思考題
第五章 重組DNA導入宿主細胞與轉化子的篩選
第一節 重組DNA向宿主細胞的導入
一、轉化(transformation)
二、通過接合作用傳遞質粒DNA
三、通過轉染/轉導作用傳遞遺傳物質
第二節 轉化子的篩選與鑑定
一、利用遺傳標誌的表型特徵篩選
二、根據重組子的結構特徵篩選
三、目的基因表達的鑑定
第三節目的基因序列測定
一、目的基因序列測定的意義
二、目的基因測序方法
複習思考題
科研實例
一、人IL-24基因克隆、重組表達
二、人白細胞介素-17F基因克隆及在大腸桿菌中的表達
第六章 外源基因在大腸桿菌中的表達調控
第一節 基因表達的概述和基本條件
一、基因表達的基本概念
二、基因表達的基本條件
三、真核基因在原核細胞中表達及調控
第二節 在大腸桿菌中影響外源基因表達的因素
一、啟動子結構對表達效率的影響
二、表達載體的選擇
三、外源基因(cDNA)中密碼子的選用
四、mRNA的一級結構與基因表達
五、mRNA的二級結構對翻譯起始的影響
六、mRNA穩定性的影響
七、轉錄終止區對外源基因表達效率的影響
八、轉錄後的若干因素與基因表達的關係
九、宿主選擇對表達的影響
十、培養條件的控制對表達效率的影響
複習思考題
科研實例
一、人IL—24基因與pET21(+)表達質粒的重組和在EColi中表達及其抗腫瘤作用
二、人白細胞介素-17F基因克隆及在大腸桿菌中的表達及其生物學活性
第七章 外源基因在真核細胞中表達及調控
第一節 真核生物基因表達的調控
一、真核生物基因表達的特點及優勢
二、真核細胞表達及調控元件
第二節 哺乳動物細胞表達系統的選擇標記基因
一、胸苷激酶基因選擇標記
二、二氫葉酸還原酶基因選擇標記
三、新黴素抗性基因選擇標記
四、氯黴素乙醯轉移酶基因選擇標記
五、黃嘌呤-鳥嘌呤轉移酶(XGPRT)基因
第三節 真核細胞表達系統的載體種類
一、載體的類型
二、幾種常用的真核表達載體
複習思考題
科研實例
人IL-24基因與pcDNA3.0真核表達質粒的構建和表達及其抑瘤效應
第八章 基因突變
第一節 基因突變的基本概念
第二節 基因突變的分類
一、點突變(poIntmutatlon)
二、鹼基插入突變
三、鹼基缺失突變
第三節 隨機突變
一、限制性內切酶法
二、接頭插入法
三、系列缺失法
四、核苷酸隨機取代法
第四節DNA的定位誘變及點突變技術
一、區域隨機誘變
二、基因的點突變技術
三、點突變技術的套用
複習思考題
科研實例
一、腺病毒介導的(m—h)ING4對A549肺癌細胞體內外生長的抑制作用及機制
二、腺病毒介導的(m—h)ING—4對A549肺癌細胞體外生長的抑制作用及機制,
三、polyA—promoter中的PacI酶切位點突變
第九章 家蠶核多角體桿狀病毒基因轉移載體及其在家蠶細胞中對外源性基因的表達
一、引言
二、家蠶核多角體病毒(BrnNPV)的特性
三、用家蠶建立的細胞系
四、家蠶核多角體病毒轉移載體
五、重組的家蠶核多角體病毒的構建
複習思考題
第十章 基因工程技術與國民經濟的關係及其套用
第一節 基因工程對農牧業發展的巨大影響
一、基因工程技術在農業上的套用
複習思考題
科研實例
第十一章 基因工程疫苗的研究與開發
第十二章 基因工程抗體與導向藥物
第十三章 基因治療
第十四章 轉基因動物和動物克隆
“醫用基因工程”(專業課)總複習練習題
附錄
參考文獻
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