酶偶聯反應法

酶偶聯法測定，即在反應體系中加入一個或幾個工具酶，將待測酶生成的某一產物轉化為新的可直接測定的產物，當加入酶的反應速度與待測酶反應速度達到平衡時，可以用指示酶的反應速度來代表待測酶的活性。

在酶活性測定時，如果底物或產物不能直接測定或難於準確測定，可採用。例如：

Ex Ea Ei

A → B → C→p

式中A為底物，B、C為中間產物，P為可直接測定的產物；Ex為待測酶，Ea和Ei都為工具酶，依據工具酶作用的不同又分別稱為輔助酶和指示酶；輔助酶在酶偶聯反應中可以一個或多個，也可以不需要；指示酶是指能監測反應速度的酶。臨床酶學分析中，以NAD（P）H/ NAD（P）+為輔酶的脫氫酶和以H2O2為底物的過氧化物酶（POD）是常用的指示酶。