酵母單雜交體系用於研究DNA-蛋白質之間相互作用的技術。其特點是可識別穩定結合於DNA上的蛋白質,可在酵母細胞內研究真核生物中DNA-蛋白質之間的相互作用,並通過篩選DNA文庫直接獲得靶序列相互作用蛋白的編碼基因。
酵母單雜交體系的原理是將已知的特定順式作用元件構建到最基本啟動子的上游,把報告基因連線到最基本啟動子的下游。然後將編碼待測轉錄因子cDNA與已知酵母轉錄激活結構域融合表達載體導入酵母細胞,該基因如果能夠與順式作用元件相結合,就能激活最基本啟動子,使報告基因得到表達
酵母單雜交體系用於研究DNA-蛋白質之間相互作用的技術。
酵母單雜交體系用於研究DNA-蛋白質之間相互作用的技術。其特點是可識別穩定結合於DNA上的蛋白質,可在酵母細胞內研究真核生物中DNA-蛋白質之間的相互作用,並通過篩選DNA文庫直接獲得靶序列相互作用蛋白的編碼基因。
酵母單雜交體系的原理是將已知的特定順式作用元件構建到最基本啟動子的上游,把報告基因連線到最基本啟動子的下游。然後將編碼待測轉錄因子cDNA與已知酵母轉錄激活結構域融合表達載體導入酵母細胞,該基因如果能夠與順式作用元件相結合,就能激活最基本啟動子,使報告基因得到表達
酵母單雜交體系自1993年由Wang和Reed創立以來,在生物學研究領域中已經顯示出巨大的威力。套用酵母單雜交體系已經驗證了許多已知的DNA與蛋白質之間...
基本用途 主要特點酵母雙雜交系統由Fields和Song等首先在研究真核基因轉錄調控中建立 。典型的真核生物轉錄因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二個不同的結構域: ...
基本思想 基本原理 發展 文庫篩選 結構組成分子雜交技術(molecular hybridization)是在研究DNA分子復性變化基礎上發展起來的一種技術。其原理是,具有互補核苷酸序列的兩條單鏈...
簡介 雜交分子 - 概述 雜交分子 - 核酸探針的種類互補的核苷酸序列通過Watson-Crick鹼基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列...
簡介 技術簡介 核酸探針標記 雙鏈DNA探針標記法 單鏈DNA探針巴斯德畢赤酵母表達系統是近十年發展起來的真核表達體系,是目前最為成功的外源蛋白表達系統之一,與現有的其它表達系統相比,巴斯德畢赤酵母在表達產物的加工、外...
簡介 畢赤酵母表達系統的特點 巴斯德畢赤酵母的載體 巴斯德畢赤酵母表達外源蛋白表達工作者共同的課題。為此,建立新型雜交和測序方法以對大量的遺傳信息進行高效...高於 400 )探針分子固定於支持物上後與標記的樣品分子進行雜交,通過檢測每個探針分子的雜交信號強度進而獲取樣品分子的數量和序列信息。通俗地說...
簡介 概念 原理 主要類型 相關技術的克隆.酵母雙雜交體系(two-hybridsystem)酵母雙雜交體系又叫...作用,形成雜種蛋白質. 酵母雙雜交體系的主要實驗過程:a.選擇缺失GAL4...32個胺基酸序列,設計PCR簡併引物,以cDNA為模板用猜測探針雜交篩選陽性...
猜測體,染色體要大得多 。人工染色體酵母人工染色體(YAC)酵母人工染色體...-2000kb的外源DNA片段。YAC是有酵母的自主複製序列、著絲點、四膜蟲的端粒以及酵母選擇性標記組成的酵母線性克隆載體。左臂含有端粒、酵母篩選標記...
原理 人工染色體 構建 常用載體 歷史事件/64四、λ噬菌體的包裝與克隆/65五、單鏈噬菌體載體和噬菌粒/68六、黏性質粒載體/70第四節 酵母細胞克隆載體與酵母人工染色體/72一、酵母附加體型質粒(YEps) /73二、酵母整合型質粒(YIps) /74三...
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