圖書信息
作 者：陳香美 主編
腎臟病學實驗技術操作規程
出 版 社：人民軍醫出版社
出版時間：2011-2-1
版 次：1
頁 數：241
字 數：379000
印刷時間：2011-2-1
開 本：16開
紙 張：膠版紙
印 次：1
I S B N：9787509146545
包 裝：精裝
內容簡介
本書全面、系統地介紹了腎臟病學研究領域中涉及的實驗技術，旨在為腎臟病專業的同仁提供一個簡明、全面、高效的實驗技術流程。全書分8章，第1章重點介紹了腎臟各種固有細胞的分離及培養方法，包括常用的商品化細胞系。介紹了常用的基因轉染方法以及雷射共聚焦檢測和流式細胞儀的最新套用。第2章主要介紹了常用的分子生物學技術，專門分析了常見的實驗失敗原因並提出對策。第3章主要介紹了常用的腎臟常規病理、免疫病理、分子病理及電鏡技術。第4章簡要介紹了轉基因及基因敲除動物模型的製備。第5章介紹了常用的腎臟疾病動物模型以及高難度大鼠腎臟發育、腎移植模型等的建立。第6章簡單介紹了電生理技術。第7章為尿液留取方法。第8章詳盡闡述了生物資源庫的標本留取、保存等過程，為開展流行病學調查和大規模臨床試驗提供研究平台。附錄對實驗室的常規制度進行了簡述。所有的技術都設定了規範化的操作流程、注意事項，並相應地列舉了本重點實驗室套用這些技術進行的研究示例。對於實驗中常見的疑點、難點、熱點問題進行了剖析。《腎臟病學實驗技術操作規程》內容豐富、實用性強，適合於腎臟病學及其他醫學領域中從事科研的醫生、學生或技師參閱。本書由陳香美擔任主編。
目錄
第1章 細胞學實驗技術
第一節 細胞培養
一、細胞復甦與凍存
二、原代近曲腎小管上皮細胞的分離培養
三、原代腎小球內皮細胞的分離培養
四、原代腎小球系膜細胞的分離培養
五、原代腎問質成纖維細胞的分離培養
六、足細胞培養
七、細胞共培養
八、成體幹細胞培養技術(大鼠骨髓間充質幹細胞)
九、細胞脂質體轉染
十、腎臟細胞電轉方法
十一、細胞原位雜交
第二節 流式細胞儀技術
一、普通細胞分選
二、細胞無菌分選
三、流式細胞儀檢測細?大小
四、流式細胞儀檢測細胞周期
五、流式細胞儀檢測細胞凋亡
第三節 共聚焦技術Ⅰ——細胞內蛋白質定位、細胞器及自噬體等亞細胞結構檢測
一、共聚焦顯微鏡常規檢測方法
二、細胞免疫螢光染色方法
三、細胞免疫螢光多重染色
四、細胞內脂肪顆粒染色及檢測
五、細胞骨架蛋白染色及檢?
六、細胞內質網染色及檢測
七、細胞內線粒體染色及檢測
八、細胞內溶酶體染色及檢測
九、細胞內自噬體染色及檢測
第四節 共聚焦技術Ⅱ——活體細胞內離子及功能的實時動態監測
一、活體細胞內離子動態檢測常規方法
二、細胞胞漿及線粒體Ca2+的染色及檢測
三、細胞內Na+染色及檢測
四、細胞內pH染色及檢測
五、細胞線粒體膜電位的染色及檢測
六、細胞內活性氧(ROS)染色及檢測
七、細胞內鈣離子震盪及鈣火花檢測
八、螢光光漂白恢復(FRAP)技術檢測細胞間通訊
九、螢光漂白丟失(FLIP)檢測細胞膜蛋白的流動性及蛋白質核轉位
十、螢光共振能量轉移(FRET)檢測蛋白質相互關係
十一、細胞X-Z縱切掃描檢測極性細胞蛋白定位
十二、細胞及組織切片三維重建
第五節 共聚焦技術Ⅲ——螢光染料/探針標記樣本存在的問題及分析對策
一、螢光標記樣品需要注意的問題
二、螢光標記實驗經常出現的問題及對策
三、典型舉例
第六節 細胞實驗其他技術
一、MTT測定細胞活力
二、細胞增殖測定(BrdU技術)
三、腎臟細胞微分離技術
四、亞細胞組分分離技術
第2章 分子生物學實驗技術
第一節 核酸的提取與純化
一、DNA的提取與純化
第3章 病理學技術
第4章 轉基因技術
第5章 腎臟疾病動物模型
第6章 電生理技術
第7章 留取尿液方法
第8章 腎臟病生物樣本資源庫的建設規範
附錄A 各實驗室崗前培訓內容
附錄B 各實驗室工作制度
