結核分枝桿菌基因擴增檢測

結核分枝桿菌基因(TB-DNA)擴增檢測是通過將細菌所含的基因片段進行體外擴增的技術,檢測懷疑結核分枝桿菌感染但無症狀者體內是否含有此類細菌的檢查方法。

檢查前準備

1.向患者交代病情,告知患者進行檢查的目的,幫助患者放鬆心情。
2.囑患者正常飲食和睡眠。

操作方法

1.標本類型有痰液、腦脊液、肺泡灌洗液、胸膜腔積液(胸水)、腹膜腔積液(腹水)、尿液、血液、分泌物等。
2.痰標本中含有大量黏蛋白和雜質,故在核酸提取前,需對樣本進行前處理,即用NaOH或變性劑進行液化洗滌。處理後的標本如不立即用於核酸提取,可保存於-20℃。
3.胸膜腔積液、腹膜腔積液穿刺液含菌量少,需要較多的標本,離心後取沉澱進行檢測。如果含有大量蛋白質和雜質,需用NaOH對樣本進行前處理。處理後4℃保存不超過24 h,-20℃保存不超過3個月,-70℃可長期保存。冰凍保存後不宜反覆凍融。
4.如標本含血,必須加紅細胞裂解液處理。處理後4℃保存不超過24 h,-20℃保存不超過3個月,-70℃可長期保存。冰凍保存後不宜反覆凍融。

參考範圍

檢測結果陰性(實時螢光PCR定性)。TB-DNA定量測定結果小於實驗室設定的參考下限(實時螢光PCR定量)。

臨床意義

1.快速診斷。因結核分枝桿菌培養周期長,臨床很難採用培養的方法進行結核分枝桿菌感染的快速檢測。通過對痰液、血液、腦脊液等標本中結核分枝桿菌的PCR檢測,可以快速診斷肺結核、結核分枝桿菌菌血症、淋巴結核、結核性腦膜炎、結核性胸膜炎及腹膜炎等。
2.治療監測。在結核治療中,採用實時螢光PCR法定期檢測,可評價抗結核藥物的療效。
3.PCR檢測的是病原體核酸,不管結核分枝桿菌是否為活的細菌,實時螢光PCR法均能檢出。因此,在抗生素治療一個療程後,必須兩周后才能做PCR檢測,以免造成假陽性結果。

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