檢查前準備
1.向患者交代病情,告知患者進行檢查的目的,幫助患者放鬆心情。
2.囑患者正常飲食和睡眠。
操作方法
1.標本類型有痰液、腦脊液、肺泡灌洗液、胸膜腔積液(胸水)、腹膜腔積液(腹水)、尿液、血液、分泌物等。
2.痰標本中含有大量黏蛋白和雜質,故在核酸提取前,需對樣本進行前處理,即用NaOH或變性劑進行液化洗滌。處理後的標本如不立即用於核酸提取,可保存於-20℃。
3.胸膜腔積液、腹膜腔積液穿刺液含菌量少,需要較多的標本,離心後取沉澱進行檢測。如果含有大量蛋白質和雜質,需用NaOH對樣本進行前處理。處理後4℃保存不超過24 h,-20℃保存不超過3個月,-70℃可長期保存。冰凍保存後不宜反覆凍融。
4.如標本含血,必須加紅細胞裂解液處理。處理後4℃保存不超過24 h,-20℃保存不超過3個月,-70℃可長期保存。冰凍保存後不宜反覆凍融。
參考範圍
檢測結果陰性(實時螢光PCR定性)。TB-DNA定量測定結果小於實驗室設定的參考下限(實時螢光PCR定量)。
臨床意義
1.快速診斷。因結核分枝桿菌培養周期長,臨床很難採用培養的方法進行結核分枝桿菌感染的快速檢測。通過對痰液、血液、腦脊液等標本中結核分枝桿菌的PCR檢測,可以快速診斷肺結核、結核分枝桿菌菌血症、淋巴結核、結核性腦膜炎、結核性胸膜炎及腹膜炎等。
2.治療監測。在結核治療中,採用實時螢光PCR法定期檢測,可評價抗結核藥物的療效。
3.PCR檢測的是病原體核酸,不管結核分枝桿菌是否為活的細菌,實時螢光PCR法均能檢出。因此,在抗生素治療一個療程後,必須兩周后才能做PCR檢測,以免造成假陽性結果。