瘦肉精檢測試劑

引簡介

瘦肉精是一類動物用藥，而不是一種特定的物質,有數種藥物被稱為瘦肉精，例如萊克多巴胺（Ractopamine）及克倫特羅（Clenbuterol）等。將瘦肉精添加於飼料中，可以增加動物的瘦肉量、抑制肥肉生長,減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因為考慮對人體會產生副作用，各國開放使用的標準不一。
瘦肉精檢測試劑是一種針對鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇等最常用的瘦肉精產品含量快速檢測試劑。

市場

目前在瘦肉精檢測試劑市場上共有三種檢測試劑類型：鹽酸克侖特羅速測卡，鹽酸克侖特羅檢測試劑條和瘦肉精檢測試劑盒。

鹽酸克倫特羅速測卡

檢測原理

本試紙採用競爭抑制免疫層析技術的原理來測定動物尿液、組織和飼料中的鹽酸克侖特羅。試劑含有被預先固定於膜上檢測帶（T）的鹽酸克侖特羅偶聯物和被膠體金標記的抗鹽酸克侖特羅單克隆抗體。檢測時樣品和標記抗體競爭結合偶聯物。檢測限為3ng/ml（3ppb）。

樣品製備

1.尿液：樣本必須用潔淨、乾燥不含有任何防腐劑的塑膠尿杯或玻璃容器收集。可直接檢測，如有渾濁請先離心（3000rpm,5min）取上清。若不能及時檢測送檢，尿樣樣本在2-8℃冷藏可以保存48小時。長期保存需冷凍於-20℃，忌反覆凍融。
2.肉：裝入大約4克碎的肉樣本（肉泥）於離心管中（醬豬牛肉加2ml水或PBS），蓋緊管蓋，在80℃左右的水浴鍋中水浴10 分鐘；吸取煮出的溶液到1.5ml的離心管中。如有明顯黃色渾濁請離心（3000rpm,5min），取上清檢測。如果檢測牛肉請吸出肉湯離心(3000rpm,5min)，取上清檢測。
3.飼料：取1g樣品粉末於離心管中，加入5ml水，混勻，置於超音波水浴中超聲30min（每10min取出混勻1次），超聲提取後冷卻至室溫，於3000rpm離心5min，取上清液進行測試。

操作步驟

1.在進行測試前先仔細閱讀使用說明書，使用前將本品和待檢樣本溶液恢復至室溫。
2.從原包裝中取出試劑，打開後平放在桌面上，請在1小時內儘快使用。
3.吸取待檢樣品溶液，緩慢滴加80~100μl(約2~3滴）於加樣孔中，加樣後開始計時。
4.在5分鐘內讀取結果，超過5分鐘的結果判讀無效。

結果判定

陽性：位置C顯示出紅色條帶，位置T無條帶或顏色非常模糊時判為陽性。
陰性：位置C顯示出紅色條帶，位置T同時出現紅色條帶時，判為陰性。
無效：位置C不顯示出紅色條帶，則無論位置T顯示出紅色條帶與否，該試紙卡均判為無效

鹽酸克侖特羅檢測試劑條

測定原理

本品採用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術，套用單克隆抗體競爭結合鹽酸克侖特羅偶聯物和樣品中可能含有鹽酸克侖特羅的原理。試劑含有被事先固定於膜上測試區（T）的鹽酸克侖特羅偶聯物和被膠體金標記的抗鹽酸克侖特羅單克隆抗體。本產品的檢測鹽酸克侖特羅濃度3ng/ml（3ppb）以上為陽性。

樣品製備

1.飼料：樣品粉碎後過20目篩，得試樣。取2g試樣於50ml離心管中，加入10ml水，混勻，置於超音波水浴中超聲30min（其間每10min取出混勻1次），超聲提取後冷卻至室溫，於2500rpm離心5min，取上清液進行測試。
2.尿液：用尿液直接進行測試，如有渾濁請先離心取上清。尿液標準必須收集在潔淨、乾燥不含有任何防腐劑的塑膠尿杯或玻璃容器內。若不能及時檢測送檢，尿樣標準在2-8℃冷藏可以保存48小時。長期保存需冷凍於-20℃，忌反覆凍融。
3.肉：裝入大約4克碎的豬肉樣本（肉泥）於離心管中，蓋緊管蓋。將裝樣品的離心管在微沸的水浴鍋中水浴10 分鐘；吸取3滴以上（約100ul）煮出的溶液到1.5ml的離心管中。如有明顯黃色渾濁請離心，使用上清液作為待測樣品溶液。
操作步驟
1.在進行測試前先完整閱讀使用說明書，使用前將本品和待檢樣本溶液恢復至室溫。
2.從原包裝中取出試劑，打開後平放在桌面上，請在1小時內儘快使用。
3.用滴管吸取待檢樣品溶液，緩慢滴加3滴於加樣孔中，加樣後開始計時。
4.結果應在10分鐘讀取，超過20分鐘的時間判讀無效。

結果判定

陽性：位置C顯示出紅色線條，而位置T不顯色時；或者位置C顯示出紅色線條，位置T顯示顏色非常模糊時判為陽性。
陰性：位置C顯示出紅色線條，位置T同時顯示出紅色線條，且T線顏色接近C線或者深於C線時，判為陰性。
無效：位置C不顯示出紅色線條，則無論位置T顯示出紅色線條與否，該試紙卡判為無效。請儘快與當地供應商聯繫。

特異性

本品檢測100ug/ml萊克多巴胺、群勃龍醋酸酯、磺胺類、氯黴素類、大環內酯類、氨基糖苷類、β-內醯胺類、氟喹諾酮類和四環素類等藥物，結果均呈陰性。使用本品檢測1ug/ml沙丁胺醇，結果顯示均呈陰性。

瘦肉精檢測試劑盒

檢測原理

測定的基礎是抗原抗體反應。微孔板上包被有針對兔IgG（Clenbuterol抗體）的羊抗體，含有克倫特羅抗原的樣品或標準品與酶標記物被加入到小孔中，經過孵育及洗滌步驟後，游離的抗原與抗原酶標記物競爭抗體結合位點，沒有結合的抗原酶標記物在清洗步驟中被除去，將顯色液加入到孔中並且孵育，結合的酶標記物將無色的發色劑轉化為藍色的產物。加入反應停止液後使顏色由藍色轉為黃色。在450nm處測量，吸光強度與樣品的克倫特羅濃度成反比。

操作步驟

稱取1克剪碎或勻漿過的樣品，置於提取液瓶中，後再加入一瓶固體提取劑，扭緊管蓋，振搖樣品一分鐘後，在100℃水浴中水浴加熱5分鐘。取出後冷卻至室溫,取清亮液體直接加樣。
從檢測卡袋中取出所需的檢測卡，放置室溫，在卡上做好樣品編號標記。用一次性取樣滴頭吸取樣品，滴入加樣孔，每孔4滴，在加液過程中勿使液體溢出加樣孔。5-10分鐘內觀察結果，10分鐘後的結果無效。

結果判定

陰性: 對照線(C)和測試線(T)同時出現，表明樣品中克倫特羅的濃度小於3ng/ml。
弱陽性：對照線(C)和測試線(T)同時出現，測試線(T)明顯淺於對照線(C)，表明樣品中克倫特羅濃度大於3ng/ml而小於5ng/ml。
陽性: 只有對照線(C),無樣品測試線(T)，表明樣品中克倫特羅的濃度大於5ng/ml。
無效: 對照線(C)和測試線(T)都不出現。或者對照線（C）不出現。