旋光度測定法
一、定義
偏振光透過長1dm並每1ml中含有旋光性物質1g的溶液,在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度。測定比旋度(或旋光度)可以區別或檢查某些藥品的純雜程度,亦可用以測定含量。
二、原理
當一單色光(鈉光譜的D線即589.3nm)通過起偏鏡產生直線偏振光向前進行,當通過裝有含有某些光學活性(即旋光性)的化合物液體的測定管時,偏振光的平面(偏振面)就會向左或向右旋轉一定的角度,即該旋光性物質的旋光度。其值可以從自動示數盤上直接讀出。
偏振光透過長1dm並每1ml中含有旋光性物質1g的溶液,在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度。
α
對液體供試品 [α]t D= ——-
ld
100α
對固體供試品 [α]t D= ———
lc
式中 [α]t D為比旋度;
D為鈉光譜的D線;
t為測定時的溫度;
l為測定管長度,dm;
α為測得的旋光度;
d為液體的相對密度;
c為每100ml溶液中含有被測物質的重量,g(按乾燥品或無水物計算)。
三、測定方法
1.打開穩壓電源開關,稍等片刻,俟電壓表指針穩定地指示在220V處。
2.打開旋光儀電源開關,經5分鐘鈉光燈發光穩定後再工作。
3.扳上直流開關,若直流開關扳上後,燈熄滅,則再將直流開關上下重複扳動1到2次,使鈉燈在直流下點亮為正常。
4.將測定管用供試品所用的溶劑沖洗3~4遍,緩緩注入適量溶劑。
5.測定管中若有氣泡,應先將氣泡浮在凸頸處,通光面兩端的霧狀液滴,套用擦鏡紙揩乾。
6.測定管螺帽不宜旋得過緊,以免產生應力,影響讀數。
7.將測定管放入樣品室,測定管安放時,應注意標記的位置和方向,蓋上箱蓋。
8.打開示數,調節零位手輪,使旋光示值為零。
9.取出測定管,將空白溶液倒出,用供試品溶液沖洗3~4遍,將供試品溶液緩緩注入測定管,用擦鏡紙擦淨測定管,特別要擦淨兩端的通光面,按相同的位置和方向正確地放入樣品室內,蓋好箱蓋。
10.示數盤將轉出該樣品的旋光度。示數盤上紅色示值為左旋(-),黑色示值為右旋(+)。
11.逐次按下複測按鈕,重複讀取旋光度3次,取3次的平均值作為測定結果。
12.如果樣品超過測量範圍,儀器在±45處自動停止,此時取出測定管,按一下複測按鈕開關,儀器即轉回零位。
13.鈉燈在直流供電系統出現故障不能使用時,儀器也可在鈉燈交流供電的情況下測試。但儀器的性能可能略有降低。
14.測定完畢後,取出測定管,將測定管用純化水洗淨。應晾乾,防塵保存。
15.關閉“示數”開關,示數盤復原。
16.關閉“直流”及“電源”開關。
17.關閉穩壓電源開關,關閉總電源開關。
18.罩好防塵罩,填寫操作記錄。
四、注意事項
1.中國藥典2000年版二部規定,用鈉光譜的D線(589.3nm)測定旋光度,除另有規定外,測定管長度為1dm(如使用其他管長,應進行換算),測定溫度為20℃。
2.配製溶液及測定時,均應調節溫度至20±0.5℃(或各藥品項下規定的溫度)。
3.供試的液體或固體物質的溶液應不顯渾濁或含有混懸的小粒。如有上述情況時,應預先濾過,並棄去初濾液。
4.每次測定前應以溶劑作空白校正,測定後,再校正1次,以確定在測定時零點有無變動,如第2次校正時發現零點有變動,則應重新測定旋光度。
5.測定供試品與空白校正,應按相同的位置和方向放置測定管於儀器樣品室,並注意測定管內不應有氣泡,否則影響測定的準確度。
6.測定管使用後,尤其在盛放有機溶劑後,必須立即洗淨,以免橡皮圈受損發粘。測定管每次洗滌後,切不可置烘箱中乾燥,以免發生變形,橡皮圈發粘。
7.測定管兩端的通光面,使用時須特別小心,避免碰撞和觸摸,只能以擦鏡紙揩試,以防磨損。應保護其光亮、清潔,否則影響測定結果。
8.測定管螺帽不宜旋得過緊,以免產生應力,影響讀數。
9.鈉燈使用時間一般勿連續使用超過2小時,並不宜經常開關。當關熄鈉燈後,如果要繼續使用,應等鈉燈冷後再開。
10儀器應放置乾燥通風處,防止潮氣侵蝕,鎮流器應注意散熱。搬動儀器應小心輕放,避免震動。
11.光源積灰或損壞,可打開機殼擦淨或更換。
12.機械部分摩擦阻力增大,可以打開後門板,在傘形齒輪、蝸輪蝸桿處加稍許鍾油。
13.如果儀器發現停轉或其它元件損壞的故障,應按電原理圖詳細檢查。
五、測定法的套用
旋光度測定法的套用主要包括以下幾個方面:
1.藥物鑑別
具有旋光性的藥物,在“性狀”項下,一般都收載有“比旋度”的檢驗項目。測定比旋度值可用來鑑別藥物或判斷藥物的純雜程度。《中國藥典》要求測定比旋度的藥物很多,如腎上腺素、硫酸奎寧、葡萄糖、丁溴東莨菪鹼、頭孢噻吩鈉等。
2.雜質檢查
具有光學異構體的藥物,一般具有相同的理化性質,但其旋光性能不同,一般有左旋體、右旋體和消旋體之分,通過測定藥物中雜質的旋光度,可以對藥物的純度進行檢查。
3.含量測定
具有旋光性的藥物,特別是在無其他更好的方法測定其含量時,可採用旋光度法測定。《中國藥典》採用旋光度法測定含量的藥物有葡萄糖注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、右旋糖酐氯化鈉注射液、右旋糖酐葡萄糖注射液等。