報告質粒

ptⅡ)、氯黴素乙醯轉移酶基因(cat)、慶大黴素轉移酶基因、葡萄糖苷酶基因、螢光酶基因等。n 在動物基因表達調控的研究中，報告基因也被廣泛套用。 常用的有氯黴素乙醯轉移酶基因(cat)、β-半乳糖苷酶基因、二氫葉酸還原酶基因、螢光酶基因等。

報告質粒就是整合有報告基因的重組質粒
報告基因 (reporter gene)是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因，也就是說，是一個其表達產物非常容易被鑑定的基因。把它的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，在調控序列控制下進行表達，從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控，篩選得到轉化體。
作為報告基因，在遺傳選擇和篩選檢測方面必須具有以下幾個條件：(1)已被克隆和全序列已測定；(2)表達產物在受體細胞中不存在，即無背景，在被轉染的細胞中無相似的內源性表達產物；(3)其表達產物能進行定量測定。
在植物基因工程研究領域，已使用的報告基因有以下幾種：胭脂鹼合成酶基因(nos)、章魚鹼合成酶基因(ocs)、新黴素磷酸轉移酶基因(nptⅡ)、氯黴素乙醯轉移酶基因(cat)、慶大黴素轉移酶基因、葡萄糖苷酶基因、螢光酶基因等。nos、ocs這兩個基因是致瘤土壤農桿菌(Agrobacterium tumfaciens)的Ti質粒特有的，對Ti質粒進行改造，用相應的致瘤農桿菌轉化植物體時，如果外源基因轉入植物體中，則這兩種報告基因在植物根莖葉中均能表達，不受發育調控，檢測時直接用轉化體提取液進行紙電泳，染色後在紫外光下觀察螢光即可。nptⅡ、cat及慶大黴素轉移酶基因，均為抗生素篩選基因，相關的酶可以對底物進行修飾(磷酸化、乙醯化等)，從而使這些抗生素失去對植物生長的抑制作用，使得含有這些抗性基因的轉化體能在含這些抗生素的篩選培養基上正常生長，也可以用轉化體提取液體，外用同位素標記，放射自顯影篩選轉化體。目前常用的一種報告基因是β-D-葡萄糖苷酶基因，該酶催化底物形成β-D-葡萄糖苷酸，它在植物體中幾乎無背景，組織化學檢測很穩定，可用分光光譜、螢光等進行檢測。螢光酶基因(luc)是1985年從北美熒火蟲和叩頭蟲cDNA文庫中克隆出來的，該酶在有ATP、Mg2+、O2和螢光素存在下發出螢光，這樣就可用轉基因植物整株或部分直接用X-光片或專門儀器進行檢測。
在動物基因表達調控的研究中，報告基因也被廣泛套用。常用的有氯黴素乙醯轉移酶基因(cat)、β-半乳糖苷酶基因、二氫葉酸還原酶基因、螢光酶基因等。cat基因作為報告基因，檢測時可通過放射自顯影觀察。螢光酶基因作為報告基因，具有檢測速度快、靈敏度比cat基因高30～1000倍、費用低、不需使用放射性同位素等優點，得到了廣泛的採用。
此外，在反式作用因子相互作用的檢測方式棗酵母雙雜交體系中，可通過報告基因的表達，研究蛋白質與蛋白質之間的相互作用。雙雜交體系是由報告基因轉錄調控區、報告基因及一對可以相互作用的雜合反式作用因子組成。近年來從上述雜交體系中發展出的單一雜交體系技術，也是根據報告基因表達量的檢測篩選出與已知順式作用元件相結合的未知因子的DNA，該項技術正廣泛套用於克隆細胞中含量微弱且用生化手段難以純化的反式作用因子。