基本簡介
Ames試驗又稱鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體(Salmonellatyphimurium/microsomeassay)試驗。本方法是利用鼠傷寒沙門菌(Salmonellatyphimurium)的組氨酸營養缺陷型菌株發生回復突變的性能來檢測被檢物質是否具有致突變性。
實驗原理
具有組氨酸缺陷型的沙門氏菌株,均含有控制His合成的基因,而培養基中不含組氨酸時,它們便不能生長。然而,當某些被檢物質具有致突變性時,因這類物質作用於細菌的DNA,使其特定部位發生基因突變而回復為有合成His能力的野生型菌株時,就又能在無組氨酸的培養基中生長。常用的沙門氏菌株有TA98、TAl535、TA100和TA1588。每種菌株所檢測的誘變物的種類不同,每次試驗可同時使用幾種菌株,只要其中有任何一株發生回變即屬陽性反應結果。
考慮到許多物質是在體內經代謝活化後才顯示出致突變性,艾姆斯等人採用了在體外加人哺乳動物肝微粒體酶系統(簡稱S-9混合液)使被檢物活化的方法,保證了試驗結果更近似於哺乳動物的代謝情況,同時可提高陽性檢出率。S-9混合液是在低溫無菌的條件下製備的,它是經多氯聯苯或苯巴比妥誘導的雄性大白鼠肝臟製成勻漿離心後的上清液。每次試驗之前從液氮罐中取出上清液後,再加入輔酶Ⅱ和6-磷酸-葡萄糖,即為配製成的肝微粒體酶系統。但是,在檢測飲用水樣時,加入S-9混合液並不能提高其陽性檢出率,而要發致突變陰性報告時,則必須要做加入S-9混合液檢驗各個項目均為陰性,並有重現性才能發陰性報告。
缺陷
這種方法的不足之處,是只能測定具有突變作用的化學物質,對非致突作用的物質不能監測。又由於鼠傷寒沙門氏菌可引起胃腸炎、腹瀉或食物中毒,所以套用這種方法進行監測時,應該特別注意防止接觸感染。還應注意防止鼠傷寒菌與小鼠群的接觸。對於致癌物質的處置,也應極其慎重小心。