內毒素測定方法有:
凝膠法
動態濁度法
終點濁度法
動態顯色法
終點顯色法
凝膠法系通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來定性檢測或半定量內毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量,使用時應加除熱原水(細菌內毒素檢查用水)復溶後使用。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應的終點。此法操作比較簡單,經濟,不需要專用測定設備,可以進行定性或半定量測定。
動態濁度法、終點濁度法、動態顯色法、終點顯色法,這四種方法都是定量檢測內毒素的。
根據檢測原理,終點濁度法和動態濁度法都屬於濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過程中的濁度變化而測定內毒素含量的方法。終點濁度法未見商品化產品。動態濁度法(又稱動態比濁法)是檢測反應混合物的濁度上升某一預先設定的吸光度所需要的反應時間,或是檢測濁度增加速度的方法。
終點顯色法和動態顯色法都是屬於顯色基質法。顯色基質法系利用鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內毒素含量的方法,根據產物顏色判斷內毒素濃度,又稱為比色法。廈門鱟試劑廠於2005年推出以鱟四肽為顯色底物的鱟試劑盒,抗干擾能力強, 靈敏度高達0.005EU/ml, 質量達到國際領先水平。目前已有500多家單位使用該試劑盒,並有部分單位發表相應文獻。國內有少量國外產品,但價格遠高於國產試劑,到貨周期長。
如果您僅需要檢測樣品的內毒素限量,可以選擇凝膠法鱟試劑,通過確定內毒素限值及最大有效稀釋倍數,做樣品的干擾試驗從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。
如果您需要定量測定樣品中內毒素含量則應選擇顯色基質鱟試劑盒或動態濁度法鱟試劑。
動態濁度法與動態顯色法需要帶溫育系統的動態光度測定儀器及配套軟體,例如,微板鱟試儀ELx808及軟體TALgent 或Gen5。動態濁度法與動態顯色法簡單方便、一步即成,線性範圍寬。
終點顯色法需要配套酶標儀或可見分光光度計進行檢測。配套帶有溫育系統的酶標儀,如微板鱟試儀ELx808,可減少試劑用量。
相關詞條
-
內毒素
內毒素,是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種成分,叫做脂多糖。脂多糖對宿主是有毒性的。內毒素只有當細菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細胞後才釋放出來,所以叫做內毒...
區別 簡介 毒性反應 檢測 血症介紹 -
內毒素基礎與臨床
內毒素的結構 內毒素血症的後果 內毒素與肝纖維化的關係
基本信息 內容簡介 -
內毒素測定
細菌內毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖(LipopolySaccharide,LPS)和蛋白的複合物,當細菌死亡或自溶後便會釋放出內毒素。內毒素大...
內毒素測定方法 -
細菌內毒素測定儀
4、輸血、輸液及植入性醫療器具細菌內毒素檢測。 5、血站血液及各種樣品內毒素檢測。 6、蛋白、質粒等分子生物學產品內毒素檢測。
細菌內毒素的檢測 細菌內毒素測定儀 -
內毒素測定儀
4、輸血、輸液及植入性醫療器具細菌內毒素檢測。 5、血站血液及各種樣品內毒素檢測。 6、蛋白、質粒等分子生物學產品內毒素檢測。
-
內毒素檢查法
本法系利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭氏陰性菌產生的細菌內毒素,以判斷供試品中細菌內毒素的限量是否符合規定的一種方法。 鱟試劑為鱟科動物東方鱟變形細胞溶解物...
-
大腸桿菌內毒素
大腸桿菌內毒素(endotoxin) 檢測範圍 96T...大腸桿菌樣本中內毒素(endotoxin)含量。 實驗原理 本試劑盒套用雙抗體夾心法測定標本中大腸桿菌內毒素(endotoxin)水平。用純化...
檢測範圍 實驗原理 試劑盒組成 標本要求 操作步驟 -
細胞內毒素檢查法
細胞內毒素檢查法Cell endotoxin test 為了保證藥品...就是細菌內毒素),1968年美國Levin和Bang創建了微量細菌內毒素...。1991年美國藥典二十二版公布了185種藥品用細菌內毒素檢查法代替家兔熱原...
正常值 臨床意義 要點 -
透析液內毒素測定
透析液內毒素測定,用於測定透析液內毒素含量的一個測定。