microRNA檢測

microRNA檢測

微型核糖核酸分子(miRNA,microRNA)是一種進化上高度保守的長度約21~23nt的內源單鏈核酸小分子。在人體內共發現了720多種miRNA。它們廣泛地分布在不同的組織器官中,通過microRNA靶向作用在轉錄後水平上對基因表達進行負調控,導致mRNA的降解或翻譯抑制。生物信息學數據顯示,每種miRNA可以調控數以百計的基因種類,預示著miRNA在生命活動中的重要地位。

基本信息

簡介

microRNA檢測 microRNA檢測
miRNA 將在疾病,特別是 癌症的診斷和治療中起到積極的深遠作用。與蛋白編碼基因表達譜相比,用miRNA表達譜對癌症進行分型更加精確可靠。此外,在常規收集的、 福馬林固定、石蠟包埋的臨床組織標本中,miRNAs都表現出較高的穩定性,更進一步預示其作為診斷性分子標記的巨大潛能。因此,研究特定細胞microRNA的表達圖譜、篩選未知miRNA、探究每種miRNA的特定功能成為當前的研究熱點。

檢測方法

常見的miRNA檢測方法包括 Northern Blot、微陣列晶片、微球、實時螢光定量PCR等技術,然而由於以下原因而各具缺陷。首先,由於miRNA本身鹼基數過少,使得探針鹼基序列的選擇受限。並且不同microRNA 具有不同的最適雜交溫度,在相同的雜交條件下,往往會引起很大程度的錯配雜交,從而限制了對於相似序列microRNA的高效識別。其次,由於miRNA 存在序列的高度相似性,所以檢測的特異性往往難以保證。
市場占主導地位的商品是Invitrogen 公司(原ABI公司)開發的實時螢光定量PCR方法(TaqMan microRNA檢測方法),該方法雖然在一定程度上克服了上述缺陷,但是仍具有高成本等缺點,限制了其廣泛套用。

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