內容簡介
miRNA能抑制其他基因的表達,並且參與眾多的生物學過程,包括細胞增殖、凋亡、細胞分化和發育。
本書介紹了miRNA的基本概念:闡述了關於miRNA預測篩選、分離和測定的多種先進的技術和方法:提供了包括在植物、線蟲、果蠅、魚、雞、小鼠和人類等一些物種中使用的多樣化、新穎和有價值的miRNA技術、並且說明了作為潛在的藥物設計工具如何使用這些技術研發miRNA。另外,還對基因調控、小RNA功能、RNA干擾機制和轉基因遺傳學等內容進行了介紹。
本書對每種方法都提供了step-by-step的實驗指導,每種方法均概述了原理,列出了所需的儀器設備和試劑,提供了實驗步驟,並對實驗中的疑難和如何避免失誤進行了提示。
本書包括:最新、最先進的miRNA研究方法和技術,易於掌握的體內、體外miRNA功能測定方法,利用miRNA技術製作的轉基因動物模型。計算機分析預測miRNA和miRNA分離技術,疾病分子發病機制和設計新治療策略的研究進展。
目錄
第1章 microRNA——調控基因功能的RNA基因概述
第2章 microRNA前體結構分析
第3章 microRNA的生物形成——分離與鑑定微處理體複合物
第4章 pri-miRNA轉錄物的識別與切割
第5章 以小鼠胚胎幹細胞為遺傳系統模型探索RNA干擾機制
第6章 microRNA與信使RNA的轉歸
第7章 microRNA靶位點預測
第8章 人類microRNA靶位點預測
第9章 哺乳動物microRNA靶位點預測的複雜性
第10章mirbase——microRNA序列資料庫
第11章 microRNA表達譜高通量分析方法
第12章 套用原位雜交技術研究microRNA在植物發育中的作用
第13章 使用螢光素酶報告系統驗證siRNA有效性
第14章 克隆哺乳動物組織中的microRNA
第15章 分析造血系統分化中microRNA表達及功能的方法
第17章 microRNA在HIV感染中的作用
第18章 HIV-1編碼的microRNA分子的克隆及檢測
第19章 脆性X染色體智力遲鈍蛋白相關mRNA及microRNA的鑑定
第20章 套用果蠅S@細胞裂解產物體外分析microRNA前體的剪下過程
第21章 用慢病毒RNA干擾表達載體下調人Cdc6蛋白
第22章 利用內含子microRNA進行體內哉體外基因沉默
第23章 分離和識別基因特異性microRNA
第24章 利用內含子microRNA的轉基因樣動物模型
第25章 miRNA的進化
第26章 展望