概述
A型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)為一直徑為27~32nm的二十面體立體對稱圓球形顆粒,無包膜,核心為單鏈正股RNA。HAV屬小RNA病毒科嗜肝病毒屬(hepatovirus)或嗜肝RNA病毒屬(heparnavirus)。HAV主要通過手-口途徑傳播,潛伏期15~50天,平均28天。病毒常在患者血清ALT升高前的5~6天就存在於患者的血液和糞便中。發病2~3周后,隨血清中特異抗體的產生,血清和糞便的傳染性就逐漸消失。HAV的實驗室診斷可進行抗原檢測。
別名
A型肝炎抗原;HAAg
HAV-Ag的醫學檢查
檢查名稱
HAV-Ag
分類
血清學檢查 > 病毒的血清學檢查
化驗取材
血液
HAV-Ag的測定原理
夾心ELISA法,即包被抗-HAV,加待檢血清,再加酶標記抗-HAV,加底物顯色,酶標儀測定OD值。若用硝酸纖維素膜(NC)代替聚苯乙烯板,即NG-EIA法,抗原的檢測可得到加強,能檢測到1ng的HAV蛋白,相當於1.5×104病毒顆粒。
試劑
國內有商品化試劑盒供應,內含抗μ鏈包被的反應板(條),HAV套用液,抗HAV-HRP標記物,以及抗HAV IgM陰、陽性對照血清,樣品稀釋液,洗滌液,底物液及終止液等試劑。
操作方法
應按試劑盒說明書進行檢測。一般試劑盒分兩類。
(1)三步法:本法操作步驟較多,檢測費時,有逐漸被二步法取代的趨勢。
①加稀釋樣品:在包被反應板(條)孔內加入1∶1000倍稀釋樣品100μl,每次實驗有陰、陽性對照,37℃保溫2h,洗板3次。
②加HAV:各孔加HAV 100μl,37℃ 1h後移至4℃過夜,洗板3次。
③加抗HAV-HRP:各孔加抗HAV-HRP 100μl,37℃保溫3h,洗板4次。
④顯色:各孔加入底物液100μl,37℃保溫15min。
⑤終止反應:各孔加入終止液50μl。
⑥結果判讀。
目測法:無色或略帶淡黃色為陰性,橘黃色為陽性。
比色法:在酶標儀上以試劑空白校零點,測各孔在492nm光密度值,當大於或等於4為陽性,低於4為陰性。
(2)二步法操作:按上法加稀釋樣品保溫、洗滌後,同時各孔加HAV 50μl及抗HAV-HRP 50μl,混勻後37℃保溫1h,洗板4次,以後同上法顯色和判讀結果。
正常值
陰性。
化驗結果臨床意義
陽性:急性A型肝炎感染,發病前1~15天HAAg陽性為70.6%~87.5%,病後1周陽性為42.9%,1~2周陽性為18.3%,半月以後少見陽性。
HAVAg存在於病人感染後10~20d的糞便中,一般在發病前1~15d從糞便中排出,臨床上不易捕捉到。發病1周時陽性率42.9%,1~2周時為18.3%,半個月後消失。因此,臨床上較少用。如果HAVAg陽性,表示病人正在感染A肝,為急性期早期。
附註
標本采靜脈血,分離血清後進行測定。