D-二聚體測定的特點:
1) 方法學原理:單克隆抗體免疫滲濾金標法,叢玉隆教授《今日臨床檢驗學》書推薦了該方法(P155) 。
2) 特異性:採用針對D-Dimer結構的抗原決定簇單克隆抗體。只對纖維蛋白降解產物D-二聚體有專 一性,血漿其他成份如纖維蛋白元,纖維蛋白單體等不會發生交叉反應。
3) 每個試劑盒提供質控品。
4) 抗干擾性強,高值膽紅素及血紅蛋白的存在不影響測定;但是血漿標本中含有血細胞或血小板可干擾結果 ;因此按規定離心去除。D-二聚體臨床套用:正常人D-二聚體<0.3mg/L。D-二聚體增高,提示體記憶體在各種血栓性疾病,同時也反應了體內纖溶活性的增強。
操作步驟:
1. 預洗:吸取50µl洗滌液R2加入反應孔內,使洗滌液浸潤反應卡。[注意勿使加樣器觸及反應孔膜!
2. 加樣:向反應孔加入50µl未稀釋的檸檬酸鹽抗凝的無血小板血漿標本或質控品,樣品應在45秒內吸入膜內。
3. 加金標抗體:向反應孔加入50µl R1,加入前須將此瓶顛倒兩次使其混勻,應在45秒內吸入膜內。
4. 用加樣器吸取50µl洗滌液R2加入反應孔中。結果判讀1. 檢測結果須在洗滌液完全吸入膜之後2分鐘內使用金標定量儀立即判讀;請參閱金標定量儀操作說明,測量範圍:0.1-20.0mg/L。2. 檢測結果以D-Dimer的濃度mg/L表示,D-Dimer濃度相當於起始纖維蛋白原(D-Dimer片段的原料)的半數。3. D-Dimer的濃度,如果大於檢測範圍,可用試劑盒中的洗滌液R2稀釋標本後檢測,結果乘以稀釋倍數。4. 陽性質控品:用於監測試劑穩定性和試驗過程,質控的結果應與瓶簽上所示的濃度相符。5. 參考值正常人的含量低於0.3mg/L;接近或高於0.3mg/L處於疾病狀態。注意事項1. 不同批號的產品不能混用2. 離心後的標本,一定要用吸管小心吸出,不可傾倒血漿,以免血細胞等成份污染血漿而影響結果3. 溫度將對結果發生影響,因此試劑、標本在操作前應達到室溫(20-25℃)(相當於放室溫30分鐘)4. 如標本在45秒內完全滲入卡內,即操作成功;如在45秒內未滲入卡內將導致假陽性高值,應保證離心力2000g條件下重新離心血漿標本,也可用微孔濾膜(孔徑0.22微米)過濾處理,直至標本能在45秒內完全滲透卡內。
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