複製過程
在研究真核細胞內線粒體DNA的複製時,發現了DNA的D環複製。複製過程四階段。D環複製的特點是兩條鏈的複製不是同步的。
1.H鏈首先合成:在複製起點處以L鏈為模板,合成─RNA引物,然後由DNA聚合酶γ催化合成一個500-600bp長的H鏈片段。該片段與L鏈以氫鍵結合,將親代的H鏈置換出來,產生D環複製中間物。
DNA片段由於分子3'端終止的位置不定而長短不一;也有一些3'端位置是固定的,而由於5'端被降解而使整個DNA片段長短不一。合成這樣500-600bp長的DNA片段不會引起線粒體DNA超螺旋結構的明顯改變。
2.H鏈片段的繼續合成:上述產生的H鏈片段由於太短而很容易被擠出去恢複線粒體DNA完整的雙螺旋結構。但有時這個片段會繼續合成,這需要依靠拓撲異構酶和螺旋酶的作用將雙鏈打開。
3.L鏈合成開始:當H鏈合成約2/3時,以被置換下來的親代H鏈為模板,離H鏈合成起點60%基因組的位置開始合成L鏈DNA,合成也需要RNA引物。
4.複製的完成:H鏈的合成提前完成,L鏈的合成隨後結束。線粒體DNA合成速度相當緩慢,約每秒10個核苷酸,整個複製過程需要1個小時。剛剛合成的線粒體DNA是鬆弛型的,需要40分鐘將其變成超螺旋型