BrdU

BrdU

EdU是另外一種胸腺嘧啶核苷類似物。它也能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在複製的DNA分子,通過基於EdU與Apollo螢光染料的特異性反應檢測DNA複製活性,通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。

基本信息

簡稱

BrdU

英文名

5-Bromo-2-deoxyUridine

中文名

5-溴脫氧尿嘧啶核苷

用途

可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),活體注射或細胞培養加入,而後利用抗Brdu單克隆抗體,ICC染色,顯示增殖細胞。同時結合其它細胞標記物,雙重染色,可判斷增殖細胞的種類,增殖速度,對研究細胞動力學有重要意義。

類似物

BrdU需要DNA變性後才能與抗體結合 BrdU需要DNA變性後才能與抗體結合

EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現象。而BrdU需要變性DNA後才能與抗體結合,破壞了DNA雙鏈結構,影響了Hochest等染色,導致染色彌散,準確性降低等問題(圖2),逐漸被EdU取代。

套用

這類鹼基替代物可以標記細胞分裂產生的時間點。因此,分時摻入BrdU和EdU可以做雙標染色觀察到不同的時間分裂的細胞。比如:用第一天給藥BrdU,第二天給藥EdU,之後染色觀察到,BrdU陽性的細胞就代表了第一天的,類似的EdU代表第二天。

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