內容提要
非放射性雜交技術分成入門,基礎技術,專業技術及套用技術等四部分。入門部分說明用地高辛標記法進行雜交技術一般操作手法及注意事項。
基礎技術部分在簡單介紹原理的基礎上,分別詳細說明常用的地高辛標記探針方法和雜交技術。
專業技術部分以染色體標本和切片標本為重點,說明地高辛標記雜交技術的專業套用及操作中的注意事項。
最後(套用技術)介紹用地高辛標記雜交技術在雙重、三重標記,整體標記,定量分析,原位PCR等方面的套用技術及其自動化的嘗試。
本書注重實用性,力求解決實際操作中可能遇到的問題,可作為生物學、醫學科研人員的工具書,也可供有關專業人員學習分子雜交理論與技術的教學參考。
章節目錄
第一篇入門
第一章操作技術、技巧,試劑- 第一節基本實驗操作技術
- 第二節試劑
第二章地高辛標記探針的製備
第二篇基礎技術
第三章蝕斑雜交與菌落雜交- 第一節濾膜的準備
- 第二節雜交
- 第三節信號的檢測
第四章Southern雜交
- 第一節染色體DNA的提取
- 第二節用限制酶切斷DNA
- 第三節已切斷DNA片段的電泳
- 第四節轉移至濾膜
- 第五節探針的製備
- 第六節雜交與探針的漂洗
- 第七節信號的檢測
- 第八節問題與處理
第五章Northern雜交
- 第一節提取RNA
- 第二節用變性瓊脂糖進行RNA電泳
- 第三節轉移至濾膜
- 第五節雜交
- 第四節探針製備
- 第六節探針的漂洗
- 第七節信號的檢測
- 第八節再雜交
- 第九節結果的定量
- 第十節問題與處理
第三篇專業技術
第六章染色體地圖法- 第一節製備染色體標本
- 第二節標記DNA探針
- 第三節雜交
- 第四節檢測與觀察信號
第七章原位雜交(In situ hybridization)
- 第一節檢出mRNA
- 第二節檢出DNA
第四篇套用技術
第八章多色螢光原位雜交法- 第一節雙色螢光原位雜交
- 第二節三色螢光原位雜交
- 第三節前期螢光原位雜交序列測定系統確定相鄰克隆的排列
第九章原位雜交技術的新探索
- 第一節薄片組織的原位雜交
- 第二節整體原位雜交
- 第三節原位雜交結果的定量分析
- 第四節原位PCR法的套用
- 第五節自動化原位雜交
後記