防守前鋒（Defensive lineman）
他們通常是整個球隊中最強壯的人，目標是對方的半衛和傳出球之前的四分衛。他們衝過對方的進攻內鋒，從而去衝擊對方持球者。根據場上位置，從中心到外分別為尖峰（Nose Tackle）或防守截鋒（Defensive Tackle）以及防守端鋒（Defensive End）。
線衛（Linebacker，LB）
重要位置，其中一個通常是防守組中發布命令的人。線衛必須要有極佳的攔截技巧，不讓持球的跑衛逾越雷池一步；而在拋傳進攻的情形時，則必須協助其它的隊友盯緊外接手及其它可能的接球手，破壞或截下任何拋傳接球。以位置分有中線衛（Middle Linebacker，MLB）和外線衛（Outside Linebacker，OLB）。
後衛（Defensive Back,DB）
防守的最後一線，這裡根據職責不同又分為幾種：
角衛（Cornerback，CB）
角衛是對方外接手的死對頭，速度和敏捷是他們的特長。一般來說他們的職責就是寸步不離緊跟對方的外接手或某些情況下的近端鋒，也有在特定陣型中突擊對方四分衛（比較冒險的舉動）。
中衛（Safety）
細分為游衛（Free Safety，FS）和強衛（Strong Safety，SS）。他們站在防守的最後方，當進攻方穿透防線或者某一接球者擺脫防守時挺身而出破壞對方進攻。
強衛在球場上是針對進攻一方的近端鋒來反應的，因為攻擊線有近端鋒列隊的一側叫做強側（strong side）。當攻方採用衝鋒進攻時，強衛要像線衛一樣地攔截跑衛與阻止攻勢，而在拋傳進攻時，則要負責緊盯近端鋒，防止他接球。
