酵母單雜系統

(min domain Pmin

酵母單雜交系統(Yeast one-hybrid system)是上世紀90年代中發展起來的研究DNA-蛋白質之間相互作用的新技術。它的基本原理是將已知順式作用元件構建到最基本啟動子 (minimal promoter,Pmin)的上游,把報告基因連線到Pmin下游。將編碼待測轉錄因子cDNA與已知酵母轉錄激活結構域 (transcription-activating domain, AD) 融合表達載體導入酵母細胞,該基因產物如果能夠與順式作用元件相結合,就能激活 Pmin啟動子,使報告基因得到表達。利用酵母單雜技術,可識別結合DNA的蛋白質;也可在酵母細胞內研究真核生物中DNA-蛋白質之間的相互作用;同時也能通過篩選DNA文庫直接獲得與靶序列相互作用蛋白的編碼基因。

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