辨別原理
（1）比色法：ALP在鹼性條件下使磷酸苯二鈉水解，生成磷酸和游離酚，後者與4-氨基安替比林作用，並經鐵氰化鉀氧化成紅色醌類化合物，其顏色的深淺與ALP活性成正比。
（2）連續監測法：ALP在鹼性條件下，使磷酸對硝基苯酚（4-NPP）釋放出磷酸基團，AMP參與磷酸醯基的轉移，促進酶反應速率，生成游離的對硝基苯酚（4-NP），並形成黃色的醌，其吸光度的增高速率與酶活力成正比。
試劑
比色法
①0.1mol/L碳酸鹽緩衝液（pH10.0）：稱取無水碳酸鈉6.36g，碳酸氫鈉3.36g，4-氨基安替比林1.5g，溶於800ml蒸餾水中，移入1000ml容量瓶內，加蒸餾水至刻度，置棕色瓶內保存。
②20mmol/L磷酸苯二鈉溶液：稱取磷酸苯二鈉（AR）2.18g，迅速加入已煮沸的500ml蒸餾水中，冷卻後加入氯仿2ml防腐，冰櫃保存。此為基質液。
③鐵氰化鉀溶液：稱取鐵氰化鉀2.5g，硼酸17g，分別溶於400ml蒸餾水中，混合後加水至1000ml，置棕色瓶內避光保存。出現藍綠色應棄去。
④酚標準貯存液（1mg/ml）：稱取重蒸餾酚1.0g，溶於0.1mol/L鹽酸中，並加至1000ml刻度。也可購買標準液。
⑤酚標準套用液（0.05mg/ml）：取酚標準貯存液5ml，加蒸餾水至100ml。
連續監測法
①1.8mol/L AMP緩衝液（pH10.3）：稱取2-氨基-2甲基-1-丙醇（AMP，MW89.14）160g，加1mol/L鹽酸320ml混合，加500ml新煮沸已涼的蒸餾水，調pH至10.3±0.02（30℃），並加上述蒸餾水至1000ml，置緊塞瓶中於冰櫃保存。
②10.5mmol/L氯化鎂溶液：稱取氯化鎂（MgCl2·6H2O，MW20 3.31）0.21g，溶於水中，並稀釋至100ml，室溫保存。
③31.5mmol/L磷酸對硝基苯酚溶液（4-NPP）：稱磷酸對硝基苯酚二鈉鹽（含6分子水，MW 371.15）120.8mg，溶於100ml蒸餾水中，置棕色瓶內於冰櫃保存。
④底物緩衝液（0.84mol/L AMP，15mmol/L 4-NPP，0.5mmol/L MgCl2，pH10.3）將AMP、4-NPP和MgCl23種溶液按10∶10∶1混合，37℃預溫待用。
正常值
(1)酶速率法(37℃)：
成人：40～160U/L；
兒童：<350U/L；
(2)磷酸苯二鈉法：
成人：3～13Kat單位；
兒童：5～30kat單位；
(3)動態法：成人：20~110U/L；
青少年：
1.男性：<750U/L；
2.女性：<500U/L；
兒童：<500U/L；
嬰兒：50~240U/L。
(註：具體參考值請根據各實驗室而定。)
臨床意義
(1)升高：
①無黃疸：肝硬化、肝細胞癌、膽管疾病(膽管癌，肝內結石)、局限性肝損害(轉移性肝癌、肝膿瘍、肉芽腫性肝損傷)、其他肝疾病(慢性肝炎、脂肪肝)、骨疾病(佝僂病骨軟化症、或骨肉瘤)、轉移性骨癌、甲狀腺功能亢進症，甲狀旁腺功能亢進症，慢性腎功能不全，惡性腫瘤(骨、肝轉移)等。
②有黃疸：病毒性肝炎、酒精性肝炎、藥物性肝損害、肝炎病毒以外的病毒引起的肝損害、原發性膽汁性肝硬化、其他肝內膽汁瘀滯、阻塞性黃疸(膽管癌、膽管細胞癌、胰頭癌，總膽管結石，硬化性膽管炎)。
(2)降低：牛奶-鹼綜合徵、壞血病、甲狀腺功能減退症、維生素D攝入過多、惡性貧血、重症慢性腎炎、呆小病、惡病質等。
偏高原因
代謝異常原因
鹼性磷酸酶主 要用於阻塞性黃疸、肝癌、膽汁淤積性肝炎等的檢查，阻塞性黃疸、原發性肝癌、繼發性肝癌、膽汁淤積性肝炎都會使鹼性磷酸酶偏高。
膽道排泄異常
鹼性磷酸酶是需要經過肝臟，然後由膽汁排出，當排泄過程中出現異常，那就會引起鹼性磷酸酶偏高。
骨骼組織原因
由於骨組織中此酶亦很活躍。因此，孕婦、骨折癒合期、骨軟化症。佝僂病、骨細胞癌、骨質疏鬆等血清鹼性磷酸酶會升高。
