培養基
通用名稱:血瓊脂平板![](/img/7/e61/nBnauM3XxIjM3YjN0cTMzEzM3MTM3gzNzIDMwADMwAjMxAzL3EzLyUzLt92YucmbvRWdo5Cd0FmLzE2LvoDc0RHa.jpg)
商品名稱:血平板培養基
英文名稱:Blood Agar
血平板培養基又叫做血平板、血瓊脂平板培養基,主要用於鏈球菌及其他苛養菌的分離、培養及溶血活性的檢測。可用於臨床標本的分離、培養。
檢驗原理
其中的蛋白腖和牛肉粉主要提供細菌生長所需要的碳源、氮源、胺基酸及維生素。氯化鈉維持培養基中的滲透壓,瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血一方面提供一些特殊的生長因子,另一方面用於觀察溶血反應。主要成分
蛋白腖 | 10g |
牛肉粉 | 3g |
氯化鈉 | 5g |
脫纖維羊血 | 50mL |
瓊脂 | 15g |
去離子水 | 1000mL |
樣本要求
1、儘量在抗菌藥物使用前採集標本。2、標本採集時應嚴格執行無菌操作,減少或者避免機體正常菌群及其他雜菌污染。
3、標本採集後應立即送至實驗室,床邊接種可提高病原菌檢出率。
4、以棉拭子採集的標本如咽拭、肛拭或傷口拭子,宜採用插入運送培養基送檢。
5、混有正常菌群的標本如可嘆、尿液、傷口拭子,不可置肉湯培養基內送檢。
6、盛標本容器須經滅菌處理,但不得使用消毒劑。
7、送檢標本應註明來源和檢驗目的,使實驗室能正確選用相應的培養基和適宜的培養環境。
檢驗方法
1、復溫:取出培養基復溫至室溫;2、接種:將取好的標本或菌株,採用劃線、塗布或者其他方法接種於培養基;
3、培養:將接種好的培養基作好標識,置於37±2℃培養箱中避光培養18~24小時,觀察結果;臨床標本應置於含有3~10%CO2的培養箱中培養18~24小時,觀察結果。
檢驗結果
1、溶血性鏈球菌通常呈現透明或半透明的灰白色小菌落(直徑1mm左右),或是較大的、粗糙的、黏液樣菌落(直徑2~4mm)。菌落周圍環繞這溶血環,α-溶血的鏈球菌呈現半透明草綠色溶血環,β-溶血的鏈球菌呈現透明溶血環。為了確認是否為鏈球菌,還應進行革蘭氏染色觀察,因為一些非鏈球菌也可在血平板培養基上形成溶血環(如大腸桿菌、銅綠假單胞菌、李斯特氏菌和溶血性葡萄球菌等)。血平板培養基上溶血性鏈球菌的菌落數量對臨床診斷有一定參考價值。2、葡萄球菌通常呈現不透明的白色或金黃色菌落,周圍環繞透明溶血環(β-溶血)或沒有溶血環。
3、李斯特氏菌可產生較小的β-溶血環,但是可通過革蘭氏染色和動力試驗與鏈球菌區分。
4、血平板培養基為非選擇性培養基,大多數非苛養菌都可生長。
局限性
由於血平板培養基採用的是脫纖維羊血,其中缺乏嘧啶核苷酸,不支持流感嗜血桿菌及某些奈瑟氏菌的生長。性能指標
外觀:血平板培養基應為半透明固體,表面平整,不得有裂痕。且培養基不得有肉眼可見氣泡及肉眼可見物(但允許有少量肉眼可見血纖維)。pH:7.2±0.2
無菌要求:將伊紅美蘭平板培養基置於37±2℃培養箱中培養7天,不得有菌生長。
質控菌檢查:
菌株 | 生長情況 |
表皮葡萄球菌(ATCC 12228) | 生長良好,白色菌落,不溶血 |
化膿鏈球菌(ATCC 19615) | 生長良好,白色菌落,β-溶血 |
肺炎鏈球菌(ATCC 49619) | 生長良好,透明菌落,α-溶血 |
注意事項
1、使用前如發現平板內培養基已經乾裂或染菌,請勿使用。2、用於細菌純化、接種或計數時,請在潔淨的環境下操作,避免雜菌干擾。
3、開封后未使用完的培養基要及時放到冰櫃冷藏儲存,避免乾裂。
4、在冰櫃儲存較久的培養基容易出現較多的冷凝水,請在潔淨環境下將水傾出,然後在培養箱放置一段時間,待其表面乾燥之後再接種。
5、棄物處理:使用後應焚燒或高壓滅菌後按一般垃圾處理。
6、僅用於體外診斷。
7、僅用於專業人員。
8、本培養基含有動物來源的產品,產品和動物均已經過檢驗,但是不能保證無致病因子存在,應與潛在感染物同等對待本產品,採取正常安全措施處理本產品(不要肌膚接觸或攝入)。