蛋白質印跡雜交

蛋白質印跡雜交，是指將蛋白質電泳、印跡、免疫測定融為一體的特異性蛋白的檢測方法。蛋白質印跡雜交技：術是一種蛋白質的固定和分析技術，是將已用聚丙烯醯胺凝膠或其他凝膠或電泳分離的蛋白質I轉移到硝酸纖維濾膜上，固定在濾膜上的蛋白質：成分仍保留抗原活性及與其他大分子特異性結；合的能力，所以能與特異性抗體或核酸結合，其|程式與DNA印跡相似，故稱為蛋白質印跡。其；流程是：生物中含有一定量的目的蛋白。

先從生物細胞中提取總蛋白或目的蛋白，將蛋白質樣品i溶解於含有去污劑和還原劑的溶液中，經SDS~：PAGE電泳將蛋白質按分子質量大小分離，再把分離的各蛋白質條帶原位轉移到固相膜（硝酸纖I維素膜或尼龍膜）上，接著將膜浸泡在高濃度的i蛋白質溶液中溫育，以封閉其非特異性位點。然後加入特異抗體（一抗）膜的目的蛋白（抗原）：與一抗結合後，再加入能與一抗專一性結合的帶i標記的二抗（通常一抗用來源於兔的抗體時，二抗常用羊抗兔免疫球蛋白抗體），最後通過二抗上帶標記化合物（一般為辣根過氧化物酶或鹼性磷酸酶）的特異性反應進行檢測。