葉盤法

植物細胞利用Ti 轉化常用的方法為葉盤法。葉盤法是一種簡單易行的植物細胞轉化、選擇與再生的方法。

具體做法是: 先將實驗材料(如菸草)的葉子表面進行消毒，再用消毒過的不鏽鋼打孔器從葉子上取下圓形小片，即葉盤。為了對葉盤進行接種處理，需將它放在土壤農癌桿菌培養液中浸泡4~ 5min,然後用濾紙吸乾，放在看護培養基上進行培養，注意需將葉子背面接觸培養基。所謂看護培養基，是特定的固體培養基上均勻分布一層胡蘿蔔細胞或其他細胞的懸浮液，然後覆蓋一層濾紙即成。葉盤在看護培養基上培養兩天后，轉移到含有適當抗生素的選擇培養基上進行培養。經過數周后，葉盤周圍會長出愈傷組織並分化出幼苗。對這些幼苗的進一步檢測(如測胭脂鹼，用Southern 印跡法、Northern 印跡法、免疫分析法等) 可以確定它們是否含外源基因以及外源基因的表達情況。

葉盤法

葉盤法實際上是對共培養法加以改進後而創立的一種轉化方法。用農桿菌感染葉片外植體並短期共培養。在培養過程中，農桿菌的vir基因被誘導，它的活化可以啟動T-DNA向植物細胞的轉移。共培養後，也要進行轉化的外植體的篩選、愈傷組織的培養、誘導分化等步驟，以得到再生植株。葉盤法由於不需進行原生質體操作等，方法簡單，獲得轉化植株也更快，是用植物外植體為材料進行轉基因的一個良好途徑。

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