臨床意義
PCR能快速特異擴增任何已知目的基因或DNA片段,並能輕易在皮克(pg)水平起始DNA混合物中的目的基因擴增達到納克、微克、毫克級的特異性DNA片段。因此,PCR技術一經問世就被迅速而廣泛地用於分子生物學的各個領域。 異常結果: 各種疾病所致的異常,例如梅毒。①一期梅毒。即硬下疳 ,潛伏期2-4周,外生殖器部位發生暗紅色硬腫塊 、淺潰瘍 ,有軟骨樣硬度,周圍淋巴結腫大。②二期梅毒。在一期梅毒 1-2 個月之後,全身皮膚、黏膜發生對稱泛發皮疹、斑疹、丘疹、膿皰疹等。黏膜可發生黏膜斑、扁平濕疣,傳染性強。③三期梅毒。發生在感染後2-3年乃至10年,皮膚為樹膠樣腫,還可涉及骨、關節、心、血管,表現為主動脈炎、主動脈瓣閉鎖不全和主動脈瘤等,侵及神經為脊髓癆 ,全身麻痹 ( 麻痹性痴呆 )等等。 需要檢查的人群:疑似某種特定的疾病病人,進行分子特異性檢查。
注意事項
不合宜人群: 沒有 檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習慣,注意個人衛生。 檢查時要求:積極配合醫生
檢查過程
PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間後,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留複製鏈重複循環變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留複製鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2-4分鐘,2-3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。到達平台期(Plateau)所需循環次數取決於樣品中模板的拷貝。 PCR技術敏感性高,特異性強,操作簡便、快速,在生命科學研究、食品衛生、醫療、法醫及環境監測等諸多方面都具有重要的套用價值。