內容簡介
細胞與分子生物學實驗教程本書是在自編教材《細胞與分子生物學實驗指導》的基礎上編寫而成的。整合了細胞生物學、醫學免疫學、醫學遺傳學、生物化學與分子生物學這些學科的實驗教學，以獨立設定的課程適應現代醫學基礎實驗教學的進步與需要。
本書分成基礎實驗、其他基本實驗技術、綜合實驗和設計性實驗引導四個部分。以電泳技術、層析技術、離心技術、蛋白質技術、PCR技術、免疫學分析基本技術、遺傳學的染色體製備分析技術和細胞學的細胞培養、顯微鏡使用作為基礎實驗，輔以教師的講授和新技術的演示，形成新的細胞與分子生物學實驗教學特色。綜合實驗將給予學生比較實用、連貫的實驗技術訓練。設計性實驗引導將注重學生科研設計、綜合分析和創新能力的培養。
目錄
第一章 緒論
第一節 概述
第二節 課程設定與要求
第三節 實驗的基本要求
一、實驗室的要求
二、實驗課的要求
三、實驗記錄的要求
第四節 實驗報告的撰寫
第二章 基礎實驗
第一節 電泳技術
實驗一 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳
實驗二 聚丙烯醯胺凝膠等電聚焦電泳分離蛋白質
實驗三 血清脂蛋白瓊脂糖電泳
實驗四 免疫電泳與對流免疫電泳
第二節 層析技術
實驗五 凝膠柱層析分離鑑定蛋白質
實驗六 DNS-胺基酸的雙向聚醯胺薄膜層析
實驗七 離子交換層析分離胺基酸
第三節 離心技術
實驗八差速離心法從鼠肝中提取核糖核蛋白體和核蛋白體RNA
一、提取核糖核蛋白體
二、提取核蛋白體RNA
實驗九 蔗糖梯度離心法分步離心核糖核酸
實驗十 小鼠脾單個核細胞的分離——密度梯度離心法
第四節 蛋白質技術
實驗十一 血清免疫球蛋白的分離、純化與定量
實驗十二 細胞總蛋白的提取
實驗十三 蛋白質定量測定方法——標準曲線法測定蛋白質含量
實驗十四western印跡法檢測表達蛋白
第五節 多聚酶鏈體外擴增技術(PCR)
實驗十五 聚合酶鏈反應(PCR)
一、PCR技術檢測β-actin基因
二、瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段
實驗十六逆轉錄PCR
一、Trizot法抽提總RNA
二、逆轉錄(RT)-PCR
實驗十七 PCR單鏈構象多態性分析(示教)
第六節 免疫技術
實驗十八 直接凝集試驗——血型鑑定實驗(玻片法)
實驗十九 雙向免疫擴散實驗
實驗二十 酶聯免疫吸附實驗(EUSA)——雙抗體夾心法
實驗二十一 細胞膜表面抗原檢測——補體依賴的微量淋巴細胞毒實驗
第七節 細胞分析技術
實驗二十二 顯微鏡使用、細胞的基本形態與結構及細胞的化學成分分析
一、光學顯微鏡的使用方法
二、過氧化氫酶分解過氧化氫實驗
三、蟾蜍血細胞內DNA的顯示
四、幾種特殊顯微鏡的基本原理和用途
實驗二十三 動物原代細胞的培養
實驗二十四 培養細胞的存活率檢測
實驗二十五 蟾蜍血細胞的體外融合
實驗二十六 細胞有絲分裂及細胞骨架的顯微觀察
實驗二十七 動物染色體的製備
第八節染色體分析技術
實驗二十八 外周血培養染色體製備技術
實驗二十九 染色體標本G顯帶製備
實驗三十 染色體C顯帶技術
實驗三十一 人類染色體非顯帶核型分析
實驗三十二 人類染色體G顯帶核型分析
第三章 其他基本實驗技術
實驗一 葡萄糖定量方法——標準管法測定葡萄糖含量
實驗二 流式細胞術(示教)
實驗三 圖像分析/電鏡觀察(示教)
一、圖像分析
二、電子顯微鏡觀察
第四章 綜合實驗
實驗一 基因組DNA分析
一、高分子量DNA的提取與純化
二、DNA的酶解
三、瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段
四、DNA轉移
五、探針標記
六、核酸分子雜交
實驗二 兔肝鹼性磷酸酶(AKP)的純化及Km的測定
一、有機溶劑法部分純化兔肝AKP
二、AKP比活性測定
三、DEAE纖維素(DE-52)離子交換層析進一步純化AKP
四、AKP Km測定
五、結果
實驗三 細胞凋亡檢測
一、細胞凋亡誘導
二、瓊脂糖凝膠檢測凋亡細胞DNA Ladder
三、TUNEL法檢測凋亡細胞
實驗四 臨床標本處理、核酸、蛋白質表達和染色體定位
一、常見組織細胞的培養方法
二、腫瘤細胞的培養方法
三、細胞的凍存、解凍和計數方法
四、細胞與組織核酸的非放射性標記原位雜交檢測技術
五、免疫細胞和組織異常蛋白表達的檢測
六、基因的染色體定位
七、FISH技術與檢測
第五章 設計性實驗引導
第一節 設計性實驗概述
第二節 設計性實驗
實驗一 選一種miRNA研究其與臨床的關係
實驗二 腫瘤細胞或組織相關細胞因子檢測分析實驗設計
實驗三 培養環境中的葡萄糖濃度對細胞的影響
實驗四 人體腫瘤小鼠移植瘤的建立和實驗
實驗五 糖代謝與腫瘤診斷和治療
實驗六 中藥提取物對人類疾病的治療作用
實驗七 免疫細胞亞群分離與鑑定
實驗八 細胞因子的測定
實驗九 外環境對免疫功能影響的實驗設計
實驗十 免疫學快速檢測方法的實驗設計
實驗十一 三體綜合徵的產前診斷方法
實驗十二 鐮形紅細胞貧血的診斷方法
附錄
附錄一 實驗誤差及其產生原因與糾正
附錄二 實驗室注意事項及應急處理
