定義
熔解溫度(melting temperature,Tm)是指吸光值增加到最大值的一半時的溫度。DNA的變性從開始解鏈到完全解鏈,是在一個相當小的溫度內完成,在這一範圍內,紫外光吸收值達到最大值的50%時的解鏈溫度,由於這一現象和結晶的融解過程類似,又稱融解溫度。
計算
有多種計算的公式,且各個的精度也各不相同。對於寡核苷酸(oligonucleotides),Tm的計算可以做到基本準確。為了方便計算,我們忽略氫鍵部分形成的情況。
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不妨假設有兩個核苷酸A和B,分別在不同的單鏈DNA上,形成雙鏈的過程可以表示為:
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反應的平衡常數可知為:。根據范德霍夫等式可得
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由熔解溫度的定義可得。又由於,因此Tm也可表示為: