一:什麼是液基細胞學?
二:液基細胞學套用範圍
宮頸刮片,胸腹水,穿刺液,痰液標本等脫落細胞學標本,典型套用為宮頸刮片。
三:液基細胞學標本處理方法
離心法和膜式負壓吸引法(簡稱TCT),離心法又分為自然沉降式(簡稱LCT)和離心甩片式
四:離心法原理
離心法就是把標本充分震盪均勻後放入離心管離心處理,脫落上皮細胞等診斷成份聚集黏附在離心管底部形成細胞團,然後倒掉細胞團上面液體(液體中含有紅細胞.粘液等成分),達到去除干擾成分的目的。
五:自然沉降式製片過程
1:把一滴細胞粘附劑滴在一張載玻片(注意磨砂面向上並留出磨砂面)的中央,把第二張載玻片正面朝下平蓋在第一張載玻片上,5分鐘後水平拉開,晾乾。
2:離心管上做好標本編號。
3:震盪標本1分鐘,然後把標本液倒入15毫升做好標本編號的離心管中。
4:把離心管放入離心機以1000轉/分離心2分鐘。
5:倒掉上清液加1毫升緩衝液後震盪10秒鐘細胞團。
6:把晾乾的載玻片標上標本號後放入製片板,並卡上製片艙。
7:把標本充分混勻後按順序倒入製片艙,8-12分鐘後倒掉製片艙中標本液,用酒精沖洗一遍後染色(可缸中染色)。
8:加入五滴蘇木素染液,染色一分鐘後用緩衝液或自來水3毫升沖洗三次。
9:加入0.5ml酒精脫色後加入五滴EA/OG,染色一分鐘。
10:用酒精沖洗乾淨,二甲苯透明後封片。
六:自然沉降式製片優點
1:製片背景清晰,細胞分布均勻無重疊。
2:因陽性上皮細胞密度比正常上皮細胞密度大,沉降後優先被細胞粘附劑捕獲,陽性率高。
七:傳統宮頸刮片缺點
1:使用刮板,棉簽等取材工具,取材不全。
2:血液,粘液等雜質覆蓋在細胞上面,用顯微鏡無法觀察。
3:細胞存在重疊現象。
以上三個因素造成診斷率低。
八:液基細胞學優點
1:使用專用宮頸細胞刷取材,取材全面。
2:去掉了血液,粘液等雜質。
3:細胞無重疊現象。
因此診斷率高。
九:膜式負壓吸引法原理
將標本充分混勻後,將下端帶有一層膜的管狀物體插入標本液小瓶中,管狀物體上端連著負壓泵,膜上有許多直徑小於上皮細胞,大於粘液小顆粒,白細胞的孔,通過負壓抽吸,使上皮細胞留在膜上,使粘液,白細胞等通過膜,達到去除雜質的目的。但血細胞也會留在膜上,使得處理雜質不完全。因宮頸炎,宮頸糜爛病人在臨床上有一個明顯表現就是觸血(即稍微一碰就出血),這使得取材中有大量血液,給標本處理帶來麻煩,國內膜式機器都要求醫生取材使用力小,使得取材不全面,進而使得陽性率降低。
十:離心甩片法原理
把標本充分混勻後,取一部分標本放入特製的離心杯裡面,離心杯的一側面連著載玻片,離心後細胞留在載玻片上,晾乾酒精固定後染色。這種辦法只能處理部分標本,且製片背景不清,片上細胞量隨取材數量多少而發生變化。
液基細胞學耗材的生產與銷售