實驗分類
梅毒抗體的實驗檢測有將梅毒的病原體菌體和將菌體成分作為抗原的實驗方法,尤其梅毒螺鏇體抗原是在大腸桿菌中發現的,被認為是梅毒主要抗原,現在檢測梅毒抗體的方法主要有EIA法、粒子凝集法、血球凝集法等.此外,還有用於快速檢查的金標法.。根據所用的抗原不同分為兩類
(1)非梅毒螺鏇體抗原血清試驗(類脂質血清反應) 用正常牛心肌的心磷脂為抗原 與梅毒患者血清中抗心磷脂抗體(即反應素)結合 結合後發現凝集 生成絮狀物為陽性反應 用於梅毒診斷 療效觀察和對復發或再感染的監測 方法有:
①性病實驗室試驗 又稱VDRL試驗):該試驗是1946年美國性病研究實驗室創建的 故以該實驗室命名 試驗在玻片上進行 可以定性或半定量 低倍顯微鏡觀察結果
②快速血漿反應素(RPR)試驗:為VDRL試驗的改良法 可使用血漿 原理是用未經處理的活性炭顆粒(直徑3~5μm)吸附VDRL抗原 此顆粒若與待檢血清中的反應素結合 便形成黑色凝集塊 肉眼即可識別 不需低倍鏡觀察 試驗在專用紙卡的反應圈(內徑18 mm)內進行 此試驗敏感性高 具一定特異性 而且經濟 方便 快速 適合大規模篩選且能定性或半定量
用活的或死的梅毒螺鏇體或其他成分作為抗原檢查抗梅毒螺鏇體抗體 這種方法敏感性及特異性都高 用於證實試驗 尤其適用晚期梅毒 但血和腦脊液行RPR試驗均為陰性者 由於這類方法檢測的是抗梅毒螺鏇體IgG抗體 即使患者已經經過充分的治療 IgG抗體仍保持陽性 所以不能用以觀察療效 復發及再感染
①螢光密螺鏇體抗體吸收試驗(FTA-ABS試驗):用間接免疫螢光法檢查血清中抗梅毒螺鏇體抗體
②梅毒螺鏇體抗體微量血凝試驗(MHA-TP):用梅毒螺鏇體提取物致敏的紅細胞微量血凝分析法檢查相應的抗梅毒螺鏇體抗體 其滴度在1∶80以上則可判定為抗體陽性 此試驗的特異性與敏感性均高 而且方法比FTA-ABS試驗簡便 故套用廣泛
③梅毒螺鏇體制動試驗(TPI):活的梅毒螺鏇體加入患者血清 在補體參與下 梅毒螺鏇體活動可受到抑制
臨床上主要採用RPR和TPHA 兩種方法檢測,RPR的敏感性和特異性均低於TPHA檢測。這主要是由於RPR是非特異性試驗,受某些自身抗體免疫疾病和傳染病的影響,常常會出現假陽性. 同時,RPR試驗對一期梅毒早期、治療後梅毒及潛伏性梅毒往往出現假陰性 ,因此它的敏感性和特異性有一定的局限性,且肉眼判斷易受檢驗者主觀因素的影響。而TPHA檢測特異性強,靈敏度高,並可實現自動化、標準化,適應大量標本的檢測。
梅毒抗體正常值
梅毒螺鏇體特異抗體(TPHA)1:40以下,定性: 陰性
快速血漿反應素試驗(RPR):陰性。
臨床意義
梅毒的診斷依賴病史、症狀、體徵,暗視野顯微鏡檢查和血清學檢查。梅毒感染者一般至少會產生兩種抗體,一種是非特異性抗體,臨床上主要採用RPR等方法檢測,優點是隨病情發展而變化,缺點是非特異性:另一種是梅毒特異性抗體(TPHA),臨床上主要採用MHA—TP、TP—EIJlSA、盯A—ABS等方法檢測,其特點是靈敏度高.特異性強。機體若無梅毒抗原刺激,一般不會產生TPHA抗體.而如產生r抗體,則可能在體記憶體在很長時間甚至終生攜帶。 不管是特異性抗體檢測還是非特異性抗體檢測,都會不同程度受到試劑、操作環境、設備等多種因素的影響,世界衛生組織推薦用RPR等方法進行過篩試驗,出現陽性者再用TPHA等方法進行確認試驗.
梅毒血清學檢查是診斷梅毒的重要依據,但還需要根據臨床症狀,體徵及不潔性行為史綜合確診.因為現在發現除梅毒外,許多其他疾病也可導致梅毒化驗結果陽性.如:生殖器皰疹,愛滋病,C型肝炎,糖尿病,系統性紅斑狼瘡,肝硬化等。
梅毒螺鏇體特異性抗體(TPHA),這種抗體一旦產生,終生是陽性的。另一種實驗是梅毒螺鏇體非特異性抗體檢測(RPR),這種抗體敏感性非常高,感染四周以上就能檢查出來.。95%的梅毒病人都會呈陽性反應;但某些白身免疫性疾病(如SLE、硬皮病)及孕婦等也會出現假陽性反應,但一般較弱。RPR可以按照病情感染的嚴重程度,滴度也會發生變化。通過觀滴度的變化即可診斷是否是活動性梅毒感染?以及治療後療效反應怎么樣,但是這種方法不是很完美的。為什麼這樣說呢?目前梅毒治療後,痊癒的過程是非常漫長的,一般需要三年的時間,我們必須通過三年觀察期,最後才能判斷梅毒是否痊癒。其根本原因,就在於目前所使用的梅毒診斷方法還是不完善。
一般說的滴度的檢查是指梅毒非特異性抗體(包括快速血漿反應素試驗RPR)的滴度,它是判斷梅毒愈後的標準,陰性就說明已愈。梅毒螺鏇體特異抗體(TPHA)是診斷的確診試驗,部分患者治癒後仍可終生陽性。這兩個試驗結果要結合來看:
第一種情況:快速血漿反應素試驗陽性, 梅毒螺鏇體特異抗體1:40以上,為正在感染梅毒。
第二種情況:快速血漿反應素試驗陰性, 梅毒螺鏇體特異抗體1:40以上,為既往感染梅毒。即便治好了,終身攜帶抗體。故RPR試驗一般用於梅毒的診斷篩選,陽性時應做梅毒螺鏇體特異性試驗加以確診。
預防
(一)、追蹤病人的性伴侶,包括病人自報及醫務人員訪問的,查找病人所有性接觸者,進行預防檢查,追蹤觀察並進行必要的治療,未治癒前配偶絕對禁止有性生活;
(二)、對可疑病人均應進行預防檢查,做梅毒血清試驗,以便早期發現新病人並及時治療;
(三)、發現梅毒病人必須強迫進行隔離治療;
(四)、對可疑患梅毒的孕婦,應及時給予預防性治療,以防止將梅毒感染給胎兒;未婚男女病人,未經治癒前不能結婚;
(五)、對已接受治療的病人,應給予定期追蹤治。
病程
梅毒和HIV病人性接觸容易感染愛滋病,同時感染HIV(尤其是進展期的HIV)會影響梅毒螺鏇體感染的診斷\自然病史及治療,但是對於沒毒的治療原則在是否有HIV感染的情況下都是相同的。儘管有多個病例報導,但關於愛滋病合併梅毒的大型研究非常少。一些研究提示HIV感染可能會改變梅毒的臨床表現,使得梅毒的臨床損害更加厲害和加速梅毒性疾病的進展。合併HIV感染的早期梅毒同樣會引起一過性的CD4T細胞計數的減少和HIV病毒載量的提高。
一期梅毒同唱會表現為在接觸部位出現單個無痛性結節,然後迅速發生潰瘍形成一個典型的硬下疳;但是,在HIV感染的人群中,會出現多形態或者是不典型的硬下疳,原發性損害也許會缺失或者不明顯。
進展到二期梅毒需要2-8周的時間。即使在HIV感染的病人中由於嚴重的免疫缺陷會出現比較快的進展,但是其臨床表現和非HIV感染病人是相似的。
二期梅毒的急性梅毒性腦膜炎,可以類似於急性原發性HIV感染症狀;出現全身症狀以及不定位的中樞神經系統症狀和腦脊液異常。
檢測方法
梅毒抗體--國產艾康
採用膠體金免疫檢潮技術和層析原理定性檢測血漬l漿)樣本中的梅毒螺鏇體抗體。檢測時樣本中梅毒抗體可與膠體金標記抗原結合形成抗原抗體複合物?由於層析作用復台物沿紙條向前移動經過檢測線時與預包被的抗原結合形成“Au—TPAg—TPAb—TP
Ag”夾心物而凝聚顯色。游離的膠體金標記梅毒抗原則在對照線處與預包被的兔抗TP抗體結合而富集顯色。陰性標本則僅在對照線處顯色。
愛滋抗體—進口愛衛
膠體金法(免疫層析法)人類免疫缺陷病毒(HⅣ1/2)抗體檢測試劑盒是套用膠體金免疫層析技術建立的靈敏、特異、操作簡便的一步法HⅣ
1/2抗體定性檢測試劑。用於定性檢測人血清或血漿樣本中的HⅣ1型和HⅣ
2型的特異性抗體,以輔助診斷HⅣ感染,其陽性結果需用免疫印跡法確認。唾液檢測試紙全球認可度比較高的是美國克利普特公司的aware愛衛品牌。