詳細介紹
首先介紹一下分光光度法
分光光度法是基於不同分子結構的物質對電磁輻射的選擇性吸收而建立起來的方法,屬於分子吸收光譜分析。當光通過溶液時,被測物質分子吸收某一波長的單色光,被吸收的光強度與光通過的距離成正比。雖然現在了解到Bouguer早在1729年已提出上述關係的數學表達式,但通常認為Lambert於1760年最早發現表達式,其數學形式為:
T=I/I0=e-kb
其中I0為入射光強,I為透射光強,e為自然對數的底,k為常數,b為光程長度(通常以cm表示)。
比爾定律等同於Bouguer定律,只是比爾定律以濃度來表達。將兩個定律結合起來,組成Beer-Bouguer定律:
T=I/I0=e-kbc
其中c為吸光物質的濃度(通常以g/L或mg/L為單位)。將上式取以10為底的對數後,得到線性表達式:
A=-logT=-log(I/I0)=log(I0/I)=εbc
其中A為吸光度,ε是摩爾吸收光係數或消光係數。
上述表達式通常稱為比爾定律。它表明,當特定波長的單色光通過溶液時,樣品的吸光度與溶液中吸收物濃度和光通過的距離成正比。
在波長、溶液和溫度確定的情況下,摩爾消光係數是由給定物質的特性決定的。實際上,測得的摩爾消光係數也和使用的儀器有關。因此,在定量分析中,通常並不用已知物質的摩爾消光係數,而是用一個或多個已知濃度的待測物質作一條校準或工作曲線。