抗生素檢測

抗生素作為一種能抑制和殺滅細菌的藥物,已被廣泛用於醫療衛生、畜禽養殖、農業生產等行業,為社會的經濟發展做出了很大的貢獻。在畜禽養殖業抗生素主要是作為飼料添加劑,用於預防和治療動物的疾病以及促進動物的生長。但是畜禽養殖業中抗生素的不合理套用的現象已經很普遍,所以需要抗生素檢測手段來規範這種現象。

原因目的

我國是抗生素的生產和使用大國,據統計每年約有6000t抗生素用於飼料添加劑,75%的抗生素不被動物機體吸收而隨動物糞便排出,導致畜禽養殖廢水成為自然界水體環境中抗生素污染的主要來源。

抗生素殘留對人體健康有著十分嚴重的危害,包括“三致”(致癌、致畸、致突變)作用、人體對此類藥物的長期暴露,通常不會造成急性中毒,而主要是引起慢性中毒。

鑒於抗生素的危害,歐盟已於2006年初全面禁止在農業中使用以促進生長為目的的抗生素。2000年丹麥政府下令,所有動物,無論大小,一律禁用抗生素飼料。美國在這方面的監督和管理也越來越嚴格。關於飼料中添加抗生素,我國也有嚴格的法規:只有30多種人畜不共用的抗生素,可作為促生長劑添加於飼料中,且對於不同動物不同的生理階段所使用抗生素的種類、劑量以及停藥期都有嚴格的規定。儘管如此,養殖戶濫用抗生素的現象依然難以監控,一方面是由於我國的法律法規不健全,監管力度不夠;另一方面是由於養殖戶為了增加收益,提高產量,縮短養殖周期,還在大量的使用抗生素。抗生素污染已被視為一類新型的重要的水體污染物而成為國際研究的前沿課題。因此,為了更好的了解畜禽養殖廢水中抗生素對自然界水環境和人類健康的影響,建立一種靈敏、快速、高效、可靠定性定量檢測方法是十分重要的。  

主要方法

由於抗生素在廢水中的濃度相對較低,所以抗生素的檢測一般都是微量或是痕量分析,常採用具有高靈敏度的儀器進行檢測。各研究機構對畜禽廢水中抗生素的檢測技術主要有色譜法和其聯用技術、酶免疫分析法、毛細管電泳法等。

色譜分析方法

液相色譜法(LC)在廢水抗生素的檢測中是最常見的,LC具有分離效能好,檢測速度快且重現性好的特點。LC法所用的檢測器有紫外檢測器(UV),螢光檢測器,以及二級管陣列檢測器。

高效液相色譜-紫外檢測器

高效液相色譜-紫外檢測器聯用檢測技術是最早用於環境中抗生素的分離檢測,由於其操作簡便以及成本低,被用於畜禽廢水中抗生素的檢測。

液相色譜-螢光檢測器

液相色譜-螢光檢測器因為其檢測限低所以也被用於畜禽廢水中抗生素的檢測,通常對本身具有螢光性的抗生素液相色譜-螢光檢測器可以直接檢測出,但是對於本身不具有螢光性或螢光性差的抗生素,需要對其衍生化來提高目標物的螢光特性以便檢測。

液相色譜串聯質譜技術

色譜可以用於多組分混合物的分離和分析,可以對有機化合物進行定量分析,但是定性較困難,質譜儀能夠對單一組分提供高靈敏度和特徵的質譜圖,但對複雜化合物無分析能力。所以將色譜與質譜進行聯用(或是串聯質譜),對複雜化合物中微量和痕量組分的定性和定量分析具有重要的意義。

由於畜禽廢水中有多種類的抗生素同時存在,利用色譜和質譜的聯用技術可以提高抗生素的定性、定量分析的可靠性、準確性、靈敏度。

酶免疫分析方法

酶免疫分析方法具有操作簡單,前處理簡化,分析成本低、靈敏、特異性強、檢測快速,不需要昂貴的儀器等,而且可以同時測定幾個樣品,但是酶免疫分析方法對試劑的選擇性高,很難同時分析多種成分,對結構類似的化合物有一定程度的交叉,分析分子量很小的化合物和不穩定的化合物有一定的困難。

用酶免疫分析方法試劑盒檢測地表水、地下水中的四環素和泰勒菌素,檢測分別為0.05μg/L,0.1μg/L。其結果表明,該方法成本低、檢測快,可用於水中的四環素、氯四環素、泰勒菌素的初篩檢測。

毛細管電泳法

毛細管電泳法是離子或荷電粒子以電場為驅動力在毛細管中按其速度或分配係數不同進行高效分離分析大的新技術。毛細管具有良好的散熱效能,可允許在毛細管兩端加上高電壓的,因此毛細管電泳法反應快,分離效力高的優點。

放射免疫測定法

經典的放射免疫測定基本原理和酶免疫分析是相同的,但所不同的是反應的放大指示系統不是酶和底物,而是放射性同位素。用於抗原或抗體標記的同位素通常是放射性較小的β放射原,最常用的是同位素是 H和 C,放射性不強、用量也極微小,比較安全。

發展趨勢

國內外使用最廣泛的還是液相色譜法及其聯用技術。高效液相色譜具有靈敏度高、精確度高、分析效力高以及檢測限低、特異性強的優點,同時也存在儀器昂貴、操作繁瑣、需要專業的分析操作人員、樣品處理複雜、成本高的缺點。所以,該種方法很難成為一種常規檢測技術。人們也在嘗試著將一些新的方法引進到畜禽廢水抗生素的檢測中,例如,酶免疫分析方法和毛細管電泳分析方法等。酶免疫分析方法具有簡便、靈敏、快速以及成本低的優點,但是其檢測的結果還要通過MS的驗證才能確證,而且國內對試劑盒的使用主要還是從國外進口,價格昂貴。我國是一個農業大國,畜禽養殖業正在從分散式向集約化模式轉變,畜禽養殖廢水量不斷的增長,抗生素對周圍水體的污染將會更加的嚴重。現有的檢測技術還不能完全檢測到水體中的各種類的抗生素,所以隨著科學技術發展以及社會對畜禽廢水中抗生素污染的重視,一種簡便、快速、準確、高效以及廉價的檢測方法,將是我國今後研究和開發的目標。

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