循環腫瘤細胞檢測

循環腫瘤細胞是指惡性腫瘤在發展過程中播散並存活於外周血中的腫瘤細胞,與腫瘤的轉移和預後密切相關。循環腫瘤細胞檢測是指對腫瘤患者外周血中的循環腫瘤細胞進行分析的方法,有助於腫瘤轉移患者的診斷、監測術後患者腫瘤的復發與轉移、評估抗腫瘤藥物的敏感性與患者預後以及選擇個體化治療的策略。

檢查前準備

向被檢測者解釋本操作的目的、方法等,消除顧慮;一般選取血液進行檢測,採血前一天應清淡飲食,避免飲酒以免影響結果,採血時避免情緒緊張。

操作方法

目前循環腫瘤細胞的檢測方法主要有兩大類:細胞計數法和核酸檢測法。
1. 細胞計數法
(1)免疫細胞化學法:以顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和細胞化學呈色反應對相應抗原進行定位、定性和定量測定。但每個載玻片上所能檢測的細胞樣本數量有限,可能會增加操作難度。
(2)流式細胞術:首先應儘快完成單細胞懸液樣本的製備,針對不同的細胞樣本進行適當洗滌、酶消化等清除雜質,使粘附的細胞彼此分離而形成單細胞狀態,對樣本進行螢光標記,通過檢測標記的螢光信號,對單細胞懸液中的單細胞進行細胞定量分析和分選。套用流式細胞術檢測癌細胞的價值在很大程度上依賴於可分析的細胞數量。
2.核酸檢測法
包括聚合酶鏈反應和反轉錄聚合酶鏈反應,主要通過檢測腫瘤患者外周血中的癌基因、抑癌基因的突變或致瘤病毒序列,也可以通過檢測某些基因改變後RNA來反映循環腫瘤細胞情況。但由於樣品的污染和目的基因在正常細胞表達等的影響,容易產生假陽性結果,從而影響檢測的特異性。

臨床意義

循環腫瘤細胞在腫瘤患者外周血中數量稀少,一般在106~107個白細胞中僅含有1個。循環腫瘤細胞檢測在乳腺癌、肺癌、結直腸癌及前列腺癌等轉移性實體瘤的微轉移、監測術後復發、療效評估與預後及個體化靶向治療等方面的有重要作用。目前,對於循環腫瘤細胞的檢測和分析比較困難,研究主要集中在尋找循環腫瘤細胞的特異性標誌物並提高檢測手段的敏感性和特異性。

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