小液流法測定水勢實驗
一、目的
學會用小液流法測定植物組織的水勢。
二、材料用具及儀器藥品
花生葉片、試管、移液管(10ml,0.1ml)、吸球、鑷子、小方塊、鑽孔器、牙籤、玻棒、蔗糖、次甲基藍。
三、原理
當把植物組織或細胞放在溶液中時,兩者便會發生水分交換。如果植物組織(或細胞)的水勢低於溶液的水勢,組織(或細胞)則吸水,使外溶液濃度增大,比重也增大;若植物組織(或細胞)的水勢高於溶液的水勢時,組織(或細胞)則失水,使溶液的濃度變小,比重也變小;如果植物組織(或細胞)的水勢與溶液的水勢相等時,外溶液的濃度不變,其比重也不變,若把浸過組織的溶液慢慢滴回同一濃度而未浸過組織或細胞的溶液中。比重小的液流便往上浮,比重大的則往下沉。如果小液流停止不動,則說明溶液的濃度未有發生改變。此溶液的滲透勢(水勢)即等於所測組織(或細胞)的水勢。根據溶液的濃度,可以用公式(ψs=-CiRT),計算出溶液的滲透勢
ψs表示滲透勢。
R表示氣體常數:0.008314MPa·l/mol·K。
T表示絕對溫度,即273+實驗時(℃)。
i表示解離係數(蔗糖解離常數為1)。
四、方法步驟
1.將1mol/L蔗糖溶液(摩爾濃度)的母液分別配成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mol/L的蔗糖溶液各10ml(如何配製?),分別注入6支大試管中,搖勻。
2.從上述的大試管中各取2ml溶液,分別放到另6支小試管中,各試管塞上軟木塞。
3.用鑽孔器鑽取葉圓片(花生葉、菠菜均可),依次分別在小試管的蔗糖溶液中各放入葉圓片40片(鑽孔器的直徑為6mm),葉圓片要全部浸在溶液中,塞上塞子,每隔5分鐘搖動一次。
4.30分鐘後,用牙籤取次甲基藍結晶少許,分別投入小試管中,搖勻。
5.用0.1ml的玻璃管從小試管中吸取溶液約0.1ml,然後將之插之相對應濃度的大試管中的中部(將下端呈直角的插入),慢慢放出藍色液,並觀察記錄小液流的流向,從中找出小液流停止不動的該溶液的濃度(每一濃度配備0.1ml移液管一支)。
6.量出該蔗糖溶液的溫度。
7.根據公式ψs=-CiRT,求出組織的水勢。