內容簡介
本書從實際套用的角度出發,具體介紹了膜片鉗技術的基本概念、方法及實驗技巧,同時還詳細介紹了美國Axon公司(現M0lecular Devices公司)生產的膜片鉗實驗儀器與採樣軟體pClamp的使用方法,對膜片鉗實驗中常見的一些問題也進行了細緻解答。本書總計5章,包括膜片鉗技術基本概念、膜片鉗技術實驗方法、腦片膜片鉗記錄技術、膜片鉗放大器及數模/模數轉換器、膜片鉗技術套用軟體。此外在附錄中還介紹了目前膜片鉗放大器的常用類型及性能特點。本書的一大特色是內容側重經驗性、技巧性的介紹,實用性很強。
本書非常適合作為從事膜片鉗技術的科技工作者(包括實驗室技術人員、大專院校和科研院所的碩士、博士研究生等)的實驗指導參考書,也可作為膜片鉗技術的培訓教材,還可作為生理學、神經科學、細胞生物學等相關專業的科研人員學習膜片鉗技術的入門書籍。另外,本書還可為實驗室購買膜片鉗放大器提供參考,對從事膜片鉗實驗設備的市場行銷人員也具有一定的參考價值。
圖書目錄
第一章 膜片鉗技術基本概念
第一節 膜片鉗技術概述
一、什麼是膜片鉗技術
二、膜片鉗技術的發展概況
三、膜片鉗技術的基本記錄模式
四、膜片鉗技術的套用
第二節 膜片鉗記錄系統中的電極
一、玻璃微電極
二、Ag/AgCl電極
三、Pt電極
四、碳纖電極
五、常見問題
第三節 膜片鉗記錄系統中的電壓和電位
一、膜電位
二、平衡電位
三、命令電壓
四、鉗制電位
五、電極電壓降
六、失調電位
七、浴池電位
八、常見問題
第四節 膜片鉗記錄系統中的電流和電導
一、跨膜電流
二、離子通道電導
三、閘門電流
四、正電流與負電流
五、內向電流與外向電流
六、去極化電流與超極化電流
七、封接電流
八、輸入漏電流
九、膜漏電流
第五節 膜片鉗記錄系統中的電阻
一、膜電阻與膜輸入阻抗
二、電極電阻
三、封接電阻
四、串聯電阻及接入電阻
五、浴池電阻
六、漏電阻
第六節 膜片鉗記錄系統中的電容
一、膜電容
二、分布電容
三、電極電容
四、快電容與慢電容
五、時間常數
第七節 膜片鉗記錄系統中的漏減功能
一、漏電流的概念與特點
二、Clampex採樣軟體的P/N漏減功能
三、Clampex採樣軟體的定標P/N漏減功能
四、膜片鉗放大器漏減功能
五、Clampfit處理軟體的漏減功能
六、常見問題
第八節 膜片鉗記錄系統中的噪聲
一、噪聲的測量指標
二、噪聲的基本類型
三、膜片鉗放大器噪聲
四、電極夾持器噪聲
五、電極噪聲
六、干擾的來源
七、干擾的排除方法
八、量化噪聲
九、混疊噪聲
十、常見問題
第九節 膜片鉗記錄系統中的信號濾波
一、有關濾波的幾個基本概念
二、濾波器的基本類型
三、數碼濾波器
四、採樣頻率與濾波頻率的關係
五、電干擾濾波器
六、常見問題
第二章 膜片鉗技術實驗方法
第一節 全細胞記錄技術
一、離子通道簡介
二、全細胞記錄要注意的問題
三、全細胞記錄與其它記錄技術的比較
四、電壓門控性離子通道的動力學研究
五、配體門控性離子通道的動力學研究
第二節 單通道記錄技術及其數據分析
一、單通道記錄模式
二、單通道數據的採集
三、單通道數據分析中的幾個基本概念
四、單通道數據分析前的處理
五、單通道事件的檢測
六、單通道電流幅度(電導)的分析
七、單通道開關的動力學分析
八、通道開放機率的計算
九、膜片上通道數目的估算
十、其它分析
第三節 穿孔膜片鉗記錄技術
一、穿孔全細胞記錄模式
二、穿孔囊泡記錄模式
三、穿孔膜片鉗記錄模式的實驗方法及注意事項
第四節 巨膜片記錄技術
一、巨膜片記錄技術的概念
二、肌細胞標本製備
三、玻璃微電極製備
四、封接的形成
五、巨膜片電容的測定
六、巨膜片記錄技術的局限
第五節 其它膜片鉗技術方法
一、膜電容測定法
二、鬆散封接記錄技術
三、脂質體記錄技術
四、細胞內膜離子通道記錄技術
五、細胞內灌注與抽吸技術
六、壓力鉗技術
七、在體膜片鉗記錄技術
第三章 腦片膜片鉗記錄技術
第一節 腦片膜片鉗技術研究概況
一、腦片標本介紹
二、腦片膜片鉗技術研究概況
第二節 腦片培養技術
一、腦片培養技術簡介
二、腦片培養方法
三、培養海馬腦片的特點
四、腦片培養的套用
第三節 海馬的結構
一、海馬的概念
二、海馬結構的細胞構築
三、海馬結構的主要傳出纖維
四、海馬結構的主要傳入纖維
五、海馬結構的內部纖維聯繫
第四節 腦片振動切片機
一、腦片切片方法簡介
二、NVSLM1型振動切片機
第五節 海馬腦片盲法膜片鉗記錄技術
一、實驗設備
二、溶液配製
三、海馬腦片製備
四、腦片孵育槽
五、腦片記錄浴槽
六、玻璃微電極製備
七、腦片盲法全細胞記錄
第四章 膜片鉗放大器及數模/模數轉換器
第一節 Axoclamp 2B微電極放大器
一、探頭
二、電極夾持器
三、模型細胞
四、前後面板
五、浴池電位的去除
六、記錄模式
七、接地和交流噪聲
八、電源
九、常見問題
第二節 Axopatch 1D膜片鉗放大器
一、探頭
二、電極夾持器
三、模型細胞
四、前後面板
五、噪聲
六、電源
七、儀器的基本連線
八、全細胞與單通道記錄操作步驟
九、常見問題
第三節 Axopatch 200B膜片鉗放大器
一、探頭
二、電極夾持器
三、模型細胞
四、前後面板
五、接地和交流噪聲
六、電源
七、全細胞與單通道記錄操作步驟
八、常見問題
第四節 Digidat 1200系列數/模和模/數轉換器
一、Digidata 1200系列轉換器之間的差別
二、Digidata 1200B前後面板
三、安裝
四、pClamp採樣軟體對Digidata 1200系列轉換器的確認
第五節 Digidat 132x系列數/模和模/數轉換器
一、Digidata 132x系列轉換器之間的差別
二、所需計算機配置
三、前後面板
四、安裝
五、pClamp採樣軟體對Digidata 1200系列轉換器的確認
六、常見問題
[附] 什麼是SCSI?
第五章 膜片鉗技術數據採集和處理軟體
第一節 pClamp數據採集和處理軟體概述
一、pClamp簡介
二、pClamp的構成
三、pClamp的安裝和運行
第二節 Clampex 8數據採集軟體
一、幾個名詞術語
二、Clampex 8主要檔案類型
三、Clampex 8採樣檔案的命名
四、Clampex 8的視窗
五、Protocol編輯
六、Configure設定
七、Lab Bench設定
八、Seal Test功能
九、Membrane Test功能
十、液接電位的計算與鉗制電位的校正
十一、常見問題
第三節 Clampfit 8數據處理分析軟體
一、Clampfit 8的視窗
二、Clampfit 8檔案類型
三、數據的基本處理功能
五、快速作圖
六、檔案的數學運算
七、擬合
八、統計分析
九、常見問題
第四節 Clampex 9數據採集軟體
一、Clampex 9採樣及分析視窗
二、Protocol編輯
三、Resistance Test功能
四、LTP助手(LTP Assistant)
五、Telegraphed Instrument設定
六、常見問題
第五節 Clampfit 9數據處理分析軟體
一、Clampfit 9的視窗
二、Clampfit 9檔案的數學運算
三、Clampfit 9的單通道數據分析功能
四、Clampfit 9的自發突觸活動分析
五、Variance-mean分析(V-M分析)
六、Clampfit 9的閾值檢測功能
七、常見問題
第六節 Origin數據分析與圖形製作軟體
一、如何將pClamp採樣數據輸入到Origin軟體進行處理
二、如何賦予數據表中各組別的名稱與特徵
三、如何對數據表中的數據進行轉換
四、作直條圖時的幾個問題
五、如何對數據進行直線回歸
六、如何對坐標軸進行調整
七、如何對坐標軸做斷軸
八、如何將幾個不同的圖顯示在同一頁面上並進行處理
九、如何對所獲數據進行曲線擬合
十、如何製作Waveform圖形
十一、如何在Origin中剪下輸入的採樣圖形
十二、如何去除壞點
十三、如何將製作好的圖形輸出
附 錄
附錄一 膜片鉗技術常用單位及換算
附錄二 膜片鉗實驗溶液中常用離子的化合價與遷移率
附錄三 膜片鉗放大器的主要類型及生產廠家
附錄四 膜片鉗技術推薦參考書
圖題與表題
一、圖題
二、表題
索引
一、中文索引
二、英文索引