固氮鐵鉬氧還蛋白
簡介
據固氮酶廈門模型Ⅱ合成的固氮酶鐵鉬輔基模擬物與缺陷型棕色固氮菌uw-45提取液重組後,在完全的酶促反應條件下,具有明顯的生物催化活性,其還原乙炔為乙烯的轉化數通常在3—6(分~(-1))之間,相當於天然鐵鉬輔基活性的1—2％左右;還原分子氮為氨的轉化數在1.5—3(分~(-1))左右,可用普通微量氨擴散法和Nessler比色法檢出。重組模擬物的乙炔轉化數與氮轉化數之比值符合於棕色固氮菌活性固氮酶相應的轉化數之比。經檸檬酸鹽處理後,以氯為外配位基的模擬物的重組活性可顯著提高。
相關資料
197夕年Shah和B九11報導了從棕色固氮菌鑰鐵旦白中分離出鐵鑰輔基(FeM。一。①,經與缺陷型的棕色固氮菌u卜芍提取液奄組,具有乙炔還原活性[l].近二、三年來已對鐵鑰輔基的理化特性及其精細結構進行了一些研究,證明‘臼是固氮酶活性中心的主要部分詳一3J.蔡啟瑞等根據固氮酶各種。
固氨酶活性中心駢聯雙座雙立方烷原子簇結構模型的一些特徵。根據這一模型。設計了鐵鉬輔基模型化合物的合成方案,合成了三系列的鐵鉬輔基模型化合物,其Mo、S~*、Fe之比如同這一模型所要求的,為1:～6:6～8。由氯化物系列和檸檬酸鹽進行配位體交換而得到的檸檬酸鹽系列中的兩個樣品,在KBH_4還原C_2H_2為C_2H_4的反應中具有很高的催化活性(按每個Mo計算,轉變數為20～30分~(-1))和選擇性(91～95％),接近天然的鐵鉬輔基的水平,並在與Av突變種UW_(45)重組後,按Shah和Brill的方法測定,顯示出明顯的固氮酶活性。
根據各種底物的己知酶促反應及絡合催化原理,我們曾推斷直鏈的。一RC三CH,n一RC三N,n一RN三C,C三N一及N三N等底物分子,都是按產。(,之)鍵型絡合在相可類型的三核活性中心上的,而且這樣的活性中心是通過共用MotV(III〕而成對地驕聯在一起的,這便.導致了第一個驕聯雙座棍合立方烷。
