染色原理
正常細胞具有完整的細胞膜結構,而死亡的細胞其細胞膜結構被破壞。台盼藍無法通過正常的細胞膜因而正常的細胞不被台盼藍染上,而死細胞則可被台盼藍染成藍色。
流程
(1)將對數生長期的細胞濃度調整為1~10×10細胞/ml,按10~10個細胞接種於96孔板,每孔100 μl;
(2)培養細胞24小時後,對其進行不同處理,每個處理設三個平行對照;
(3)收集細胞,經台盼藍染色,在倒置顯微鏡下計數藍染及不染色細胞,計算細胞存活率;
(4)結果統計:
鏡下觀察,死細胞被染成淡藍色,而活細胞拒染。
根據下式求細胞活力:
活細胞率(%)= 活細胞總數/(活細胞總數+死細胞總數)×100
注意事項
台盼藍染細胞時,時間不宜過長。否則,部分活細胞也會著色,會干擾計數。