凝膠成像定義
圖像分析程式,適用於ID膠、斑點/狹縫印跡、平板、菌落、放射自顯影、多排膠、蛋白膠、GFP、PCR、考馬斯亮藍及銀染的膠及ZYMA膠;可進行凝膠圖像分析、克隆計數分析、手動條帶定量和斑點分析。
軟體介紹
套用範圍
凝膠分析軟體主要套用於生物醫學、醫藥領域,為科研人員提供了分析凝膠圖像及其它生物學條帶的途徑。
主要功能
1.凝膠圖像剪輯處理,標記;
2.自動尋找凝膠條帶;
3.與公用的標準條帶或自選的標準條帶比較;
4.條帶(泳道)遷移路徑的校正;
5.核酸、蛋白的處理,計算相應的分子量等數值;
6.詳細的分析結果可輸出成EXCEL格式,根據需要編輯。
套用範圍
從整體總的來說凝膠成像(系統)可套用於:蛋白質、核酸、多肽、胺基酸、多聚胺基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析
(1)分子量定量
對於一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,並以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要準確很多。
(2)密度定量
一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統和軟體,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標準條帶進行密度標定以後,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用於對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
(3)密度掃描
在分子生物學和生物工程研究中,我們最常用到的是對蛋白表達產物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統的方法就是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟體結合現在實驗室常規配備的掃瞄器或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
(4)PCR定量
PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟體計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上並不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量並計算其占總和的百分數,密度掃描時並對選擇區域生成縱向掃描曲線圖並積分。
凝膠成像種類
(1)UV凝膠成像分析系統:可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進行圖象採集並進行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監測;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見樣品成像);
(2)藍光凝膠成像分析系統:SYBR Green等Green 類安全染料。以藍光為激發光源的凝膠成像分析系統可取代UV,可減少紫外對人體皮膚和雙眼造成灼燒。
凝膠成像品牌
凝膠成像儀屬於高科技產品,是需要軟、硬體緊密一致配合的高端分子生物分析儀器。主要用於科研、醫療、教學等項目,目前國內進口品牌和國產品牌的市場占有率差不多。
目前凝膠成像廠家很多,市場上常見的凝膠成像如:
進口品牌
進口品牌美國的市場上見的是相對比較多的有:UVP、伯樂、alpha、SIM、KODAK、GE、Wealtec等;德國品牌主要有:Royal、Raytest等;英國品牌:UVI、Fedbio等;法國品牌:VL、Vilber Lourmat等;以色列DNR;日本品牌:富士、ATTO等;荷蘭Isogen等等。目前這些國內進口品牌和國產品牌的市場占有率差不多,但是價格高於國產品牌。
國產品牌
中國本土企業也掌握了凝膠成像核心技術,性能方面不比進口差,價格又比進口的低。
成像儀特點
自動對焦(Auto Focus)凝膠成像分析系統,解決了新手在拍攝凝膠照片過成中,經常發生的被拍攝照片的亮度和對比度,焦距不準使照片不清晰的問題。
簡介
自動對焦(Auto Focus)是利用物體光反射的原理,將反射的光被相機上的感測器CCD接受,通過計算機處理,帶動電動對焦裝置進行對焦的方式叫自動對焦.它多分為二類:一是主動式,另一個則是被動式。
分類
1、主動式自動對焦:相機CCD上的紅外線發生器、超音波發生器發出紅外光或超音波到被攝體。相機CCD上的接受器接受反射回來的紅外光或超音波進行對焦,其光學原理類似三角測距對焦法,廣泛用於各種平視取景相機.主動式對焦對斜面,光滑面對焦困難.對亮度大,遠距離的被攝體對焦困難.這是由於發出的光被反射到其它方向,或達不到被攝體所至.主動式由於是相機主動發出光或波,所以可以在低反差、弱光線下對焦.對細線條的被攝體,對動體都能自動對焦.缺點是當被攝體能吸收光或波時對焦困難,還會被玻璃反射故透過玻璃對焦困難。
2、 被動式自動對焦:即直接接收分析來自景物自身的反光,進行自動對焦的方式.這種自動對焦方式的優點是;自身不要發射系統。對具有一定亮度的被攝體能理想的自動對焦,在逆光下也能良好的對焦.對遠處亮度大的物體能自動對焦。但缺點是對細線條的被攝體自動對焦較困難.在低反差,弱光下的對焦困難.對動體自動對焦能力差.對含偏光的被攝體自動對焦能力差.黑色物體或鏡面的對焦能力差。 主動、被動式自動對焦方式各有千秋,好在我們首創的凝膠成像自動對焦拍攝系統上有二種自動對焦方式,可以互補使用,自動切換,發揮其強項,克服其弱點。
多種光源可選
一般的凝膠成像系統,提供 302nmUV、254nmUV、365nmUV、藍光及白光光源。
安全防護隔離
觸摸控制電源開關、光源控制、光圈、聚焦等觀察和拍攝工作,實現污染現場和電腦操作現場隔離,防止交叉污染,確保操作者安全,抽屜式樣品載物台,方便取放樣品。
直接切膠
凝膠成像系統也可直接切膠,操作應遵循說明書的指示,尤其注意對激發光源(無論是紫外,白光或者藍光)進行相應的防護。