簡介
六通閥進樣器是高效液相色譜系統中最理想的進樣器,它是由圓形密封墊(轉子)和固定底座(定子)組成。美國Rheodyne公司的六通閥進樣器最為通用,各大HPLC儀器製造商均以此產品作為儀器的進樣器。
工作原理
六通閥進樣器的工作原理:手柄位於取樣(Load)位置時,樣品經微量進樣針從進樣孔注射進定量環,定量環充滿後,多餘樣品從放空孔排出;將手柄轉動至進樣(Inject)位置時,閥與液相流路接通,由泵輸送的流動相衝洗定量環,推動樣品進入液相分析柱進行分析。
雖然六通閥進樣器具有結構簡單、使用方便、壽命長、日常無需維修等特點,但正確的使用和維護將能增加使用壽命,保護周邊設備,同時增加分析準確度。如使用得當的話,六通閥進樣器一般可連續進樣3萬次而無需維修。手柄處於Load和Inject之間時,由於暫時堵住了流路,流路中壓力驟增,再轉到進樣位,過高的壓力在柱頭上引起損壞,所以應儘快轉動閥,不能停留在中途。在HPLC系統中使用的注射器針頭有別於氣相色譜,是平頭注射器。一方面,針頭外側緊貼進樣器密封管內側,密封性能好,不漏液,不引入空氣;另一方面,也防止了針頭刺壞密封組件及定子 。
進樣方式
六通閥進樣器的進樣方式有部分裝液法和完全裝液法兩種。使用部分裝液法進樣時,進樣量最多為定量環體積的75%,如20μl的定量環最多進樣15μl的樣品,並且要求每次進樣體積準確、相同;使用完全裝液法進樣時,進樣量最少為定量環體積的3至5倍,即20μl的定量環最少進樣60至100μl的樣品,這樣才能完全置換樣品定量環內殘留的溶液,達到所要求的精密度及重現性。推薦採用100ul的平頭進樣針配合20ul滿環進樣。可根據進樣體積的需要自已製作定量環,一般不要求精確計算定量環的體積,譬如,一根名義上10μl的定量環,實際是9μl還是1lμl並不重要,因為被測樣品和校正樣品的進樣體積保持一致,在計算結果時誤差都被抵消了。
進樣樣品要求無微粒和能阻死針頭及進樣閥的物質,樣品溶液均要用0.45μm的濾膜過濾。防止微粒阻塞進樣閥和減少對進樣閥的磨損。為防止緩衝鹽和其它殘留物質留在進樣系統中,每次結束後應沖洗進樣器,通常用不含鹽的稀釋劑、水或不含鹽的流動相衝洗,在進樣閥的Load和Inject位置反覆沖洗,再用無纖維紙擦淨注射器針頭的外側 。