最新分子生物學實驗技術 內容簡介
本書著重介紹了國際上近年發展起來的分子生物學及生物技術方面的新技術、新方法。包括：DNA與蛋白質相互關係；cDNA文庫構建及目的基因的篩選；抗體工程；絲狀噬菌體表面顯示技術的基本原理和套用；實用DNA突變技術；外源基因在哺乳動物細胞中的表達等。最新分子生物學實驗技術 本書目錄
序前言
第1章 DNA與蛋白質相互關係
1.1 細胞核蛋白質的提取
1.1.1 細胞核蛋白質的提取
1.1.2 細胞核提取物的快速製備法
1.2 凝膠滯後實驗
1.2.1 凝膠滯後實驗
1.2.2 超級凝膠電泳
1.3 干擾實驗
1.3.1 甲基化干擾實驗
1.3.2 尿嘧啶干擾實驗
1.4 脫氧核糖核酸酶Ⅰ足跡分析
1.5 隨機PCR
1.5.1 寡核苷酸的設計與合成
1.5.2 寡核苷酸的純化
1.5.3 探針標記
1.5.4 凝膠滯後實驗純化探針
1.5.5 特異結合序列的克隆與序列分析
1.6 核酸-蛋白質雜交實驗
1.6.1 電泳及電轉移
1.6.2 標記探針
1.6.3 蛋白質變性、復性
1.6.4 雜交及放射自顯影
參考文獻
第2章 cDNA文庫構建及目的基因的篩選
2.1 cDNA第一條鏈的合成
2.1.1 cDNA第一條鏈合成的策略
2.1.2 cDNA第一條鏈合成的操作步驟
2.2 cDNA第二條鏈的合成
2.2.1 置換合成法
2.2.2 PCR法
2.3 cDNA克隆的其他策略
2.3.1 加尾載體作引物引導cDNA合成――定向克隆
2.3.2 Okayama-Berg克隆法――定向克隆
2.3.3 末端加尾直接克隆――非定向克隆
2.3.4 加接頭直接克隆――非定向克隆（雙鏈cDNA末端無酶切位點）
2.3.5 加接頭克隆――定向克隆（雙鏈cDNA一端帶酶切位點）
2.3.6 加連線於克隆――非定向克隆（雙鏈cDNA末端無酶切位點）
2.3.7 加連線子克隆――定向克隆（雙鏈cDNA一個末端帶有酶切位點）
2.3.8 PCR產物的直接克隆――非定向克隆
2.3.9 PCR產物的黏瑞克隆法――定向克隆（兩個PCR引物均帶酶切位點）
2.3.10 無連線酶克隆法
2.4 重組子的篩選與鑑定
2.4.1 根據遺傳表型篩選
2.4.2 分析重組子結構特徵的篩選法
2.5 構建cDNA文庫新方法
2.5.1 減數cDNA文庫
2.5.2 標準化cDNA文庫
2.6 mRNA差示顯示技術
2.6.1 基本原理和方法
2.6.2 最佳化反應條件
2.6.3 差異顯示技術在生物醫學中的套用
2.6.4 差異顯示技術存在的問題及改良措施
2.6.5 差異顯示技術與相關方法的比較
2.6.6 差異顯示技術的展望
2.7 人類基因組計畫及後基因組計畫
2.7.1 物理圖譜的製作
2.7.2 測序及尋找新的功能因子
2.7.3 人類後基因組計畫
參考文獻
第3章 抗體工程
3.1 基因工程抗體的免疫學基礎
3.1.1 免疫應答
3.1.2 抗體的分子結構和功能
3.1.3 抗體基因的DNA重排
3.1.4 抗體庫的產生
3.1.5 抗原抗體的結合
3.2 噬菌體表面表達技術與噬菌體抗體
3.3 基因工程重組抗體――Fab抗體
3.4 基因工程重組抗體――單鏈抗體scFv
3.5 Fab段抗體和scFv單鏈抗體表達產物的純化和鑑定
3.6 重組抗體全免疫球蛋白基因的表達
參考文獻
第4章 絲狀噬菌體表面顯示技術的基本原理和套用
第5章 聚合酶鏈反應
第6章 實用DNA突變技術
第7章 外源基因在哺乳動物細胞中的表達
第8章 DNA序列測定
第9章 蛋白質的表達
第10章 蛋白質與蛋白質相互作用的研究策略
第11章 生物晶片技術
第12章 生物信息學
附錄1 實驗室細胞培養的若干問題
附錄2 常用溶液與配製
