WST-1是由日本同仁化學研究所(Dojindo)開發的第一個水溶性四唑鹽試劑,之後又開發了WST的系列產品,在國內外擁有專利和註冊商標。
WST-1是一種廣泛套用於細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑,同樣可用氧化應激檢測(檢測SOD)等,被開發成WST-1細胞增殖、細胞毒性檢測試劑盒,超氧化物岐化酶(SOD)檢測試劑盒(SOD Assay Kit- WST)等。
水溶性四唑鹽(WST)是通過向四唑鹽的苯環中引入正電荷或負電荷以及羥基而產生的。Dojindo的WST具有磺酸基,它們直接或間接地加入苯環以增進水溶性。Dojindo還提供幾種新開發的苯偶氮型四唑鹽,它可被NADH或其他還原劑輕易地還原得到橙色或紫色的甲臢染料。由於採用苯偶氮基團,顏色會隨重金屬離子而改變。由於Dojindo的WST水溶性較高,因此可以製備10 mM - 100 mM不同濃度的溶液。
WST-1是一種類似於MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-1和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去後續的溶解步驟。其次,WST-1產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加穩定,使實驗結果更加穩定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,線性範圍更寬,靈敏度更高。可以用於細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用於抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測等。WST-1使用時無須同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必採用額外步驟去溶解formazan。 WST-1對細胞無明顯毒性。加入WST-1顯色後,可以在不同時間反覆用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便於找到最佳測定時間。
同仁化學在近些年開發的WST-8是比WST-1更新一代的水溶性四唑鹽,WST-8比WST-1更加穩定,靈敏度更高,溶解性更強,更易於保存。同仁化學並將其作為主要成分,生產出細胞毒性/增殖檢測試劑盒CCK-8,以在國內外得到廣泛認可。
WST甲臢染料是同仁化學研究所的註冊商標
WST甲臢染料的吸光圖譜123