FPLC快速純化技術

FPLC快速純化技術用於治療重組腺病毒

傳統上，重組腺病毒的純化方法是用CsCl（氯化

銫）線性密度梯度超速離心，僅可做少量製備，且存在銫殘留問題，不適合臨床級藥品和工業化生產要求。1996年開始在實驗室使用柱層析方法純化重組腺病毒的技術，一般是採用陰離子柱和親和層析柱二步方法，可高效純化重組腺病毒。純化工藝穩定可控，適於大規模生產。但是二步層析柱方法費時間，而且樣品損失增加了30%，更重要的是處理時間的延長和環節增多，會影響樣品的活性。近年來，Target Genetics、Sigma等公司發展了一步層析柱純化方法，但由於層析填料及待純化樣品等問題，製品的純度不及上述CsCl（氯化銫）線性密度梯度超速離心方法和二步層析柱方法。根據我們的初步經驗，發展一步層析柱純化方法的關鍵是：1）FPLC層析程式的設計；2）層析填料的選擇；3）待純化樣品的濃縮和過濾前處理。發展該技術不僅可以用於腺病毒的純化，同時也進一步推動我國純化工藝工程技術的發展。