DNFB反應

DNFB在弱鹼性溶液中發生親核芳環取代反應而生成二硝基苯基胺基酸，簡稱DNP-胺基酸。

2，4二硝基氟苯簡稱DNFB或FDNB。

此反應首先被英國的Sanger用來鑑定多肽、蛋白質的N-末端胺基酸。

法一般套用於蛋白質一級結構的測定。

DNFB與蛋白質在室溫，pH=8.0~9.0條件下反應，生成DNP-蛋白；隨之，在105℃，6mol/LHCl條件下水解，生成DNP-胺基酸及其它游離胺基酸。由於DNP-胺基酸溶於乙醚，而其餘胺基酸不溶，故用乙醚抽提出DNP-胺基酸，再將未知樣的DNP-胺基酸與已知標準DNP-胺基酸在相同條件下進行紙層析，根據Rf值即可推斷未知樣N-末端為何種胺基酸。