對照品溶液的製備 精密稱取沒食子酸對照品50mg,置100ml棕色量瓶中,加水溶液並稀釋至刻度,精密量取5ml,置50ml棕色量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml中含沒食子酸0.05mg)。
標準曲線的製備 精密量取對照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml,分別置25ml棕色量瓶中,各加入磷鉬鎢酸試液1ml,分別加水11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml,用29%碳酸鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,放置30分鐘以相應的試劑為空白,照紫外可見分光光度法,在760nm的波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪製標準曲線。
供試品溶液的製備 取藥材粉末適量(按品種項目下的規定),精密稱定,置250ml棕色量瓶中,加水150ml,放置過夜,超聲處理10分鐘,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,靜置(使固體物沉澱),濾過,棄去初濾液50ml,精密量取續濾液20ml,置100棕色量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,即得。
測定法 總酚 精密量取供試品溶液2ml,置25ml棕色量瓶中,照標準曲線的製備項下的方法,自“加入磷鉬鎢酸試液1ml”起,加水10ml,依法測定吸光度,從標準曲線中讀出供試品溶液中沒食子酸的量(mg),計算,即得。
不被吸附的多酚 精密量取供試品溶液25ml,加至已盛有乾酪素0.6g的100ml具塞錐形瓶中,密塞,置30℃水浴中保溫1小時,時時振搖,取出,放冷,搖勻,濾過,棄去初濾液,精密量取續濾液2ml,置25ml棕色量瓶中,照標準曲線的製備項下的方法,自“加入磷鉬鎢酸試液1ml”,加水10ml,依法測定吸光度,從標準曲線中讀出供試品溶液中沒食子酸的量(mg),計算,即得。
按下式計算鞣質的含量:
鞣質含量=總酚量-不被吸附的多酚量