酶學及其研究技術

酶學及其研究技術

《酶學及其研究技術》是2010年8月1日廈門大學出版社在出版的圖書,作者是陳清西。

內容簡介

《酶學及其研究技術》系統介紹現代酶學研究的原理及技術路線,主要圍繞酶的分離純化、理化性質、酶促反應動力學、熱力學、失活動力學、化學修飾動力學、變性動力學、酶活力調控、酶活性中心功能基團性質、酶結構與功能、酶抑制劑的分子設計與改造及酶製劑的生產套用等。

《酶學及其研究技術》的特色是將科研成果有機地融合起來,並以幾種海洋動物酶的研究為實例貫穿到相應的各個章節。

《酶學及其研究技術》理論基礎和實驗技能並重,強調實驗設計技能、操作技巧,適合作為本科生、研究生的教學與科研參考書。

作者簡介

陳清西,男,教授,博士生導師。清華大學理學博士學位.中共黨員。現任廈門大學生命科學學院生物化學與生物技術系主任。

1982年1月畢業於廈門大學.獲學士學位;1985年1月畢業於廈門大學,獲碩士學位:1999年7月畢業於清華大學,獲理掌博士學位。1998年晉升為教授,2001年被評為博士生導師。

2000年1月一2002年2月在美國加州Berkeley大學工作2年。研究成果獲得“教育部自然科學獎二等”1項、“福建省科學技術進步獎三等獎”2項。發表研究論文228篇,其中在國際SCI源學術刊物發表92篇。

現任中國酶學專業委員會副主任;中國蛋白質專業委員會委員:中國農業生物化學與分子生物學理事;福建省生物化學與分子生物學學會副理事長:福建省食品工、業協會技術專業委員會委員;廈門市農學會常務理事:廈門市生物化學與分子生物學副理事長兼秘書長;《廈門大學學報(自然科學版)》副主編、《中國生物化學與分子生物學學報》編委。2003年入選教育部跨世紀人才。2009年被遴選為廈門大學特聘教授。

圖書目錄

第一章 概論

第一節 酶的概念和酶學研究的重要性

一、酶是什麼

二、酶學研究的重要性

三、酶學研究歷史

四、現代酶學概況

第二節 酶的組成及結構特點

一、酶的化學本質

二、酶蛋白亞基數的組成特點分類

三、酶的組成分類

四、酶的輔助因子

第三節 酶的分類與命名

一、習慣命名法

二、國際系統命名法

三、國際系統分類法

第四節 酶作為催化劑的特點

一、酶與一般催化劑比較的共性

二、酶作為催化劑的顯著特性

第五節 酶的專一性

一、酶的專一性分類

二、幾種蛋白酶的專一性

第二章 酶的分離純化

第一節 酶分離純化的一般原則

一、確立酶活力測定方法

二、原材料的選擇與處理

三、酶的純化方法

四、酶的純度鑑定

第二節 酶的提取

一、生物材料的破碎

二、酶的抽提

第三節 酶的純化

一、沉澱法

二、離子交換柱層析技術

三、凝膠過濾柱層析法

四、親和層析

五、其他分離純化方法

六、酶純化方法的選擇與實驗設計

第三節 酶活力的測定

一、酶活力測定的一般原則

二、初速度

三、酶活力單位

四、酶活力測定的主要方法

第四節 酶製劑的濃縮、乾燥及保存

一、濃縮的主要方法

二、保存

第五節 酶純度的鑑定技術

一、酶純度的評價

二、電泳法

三、其他方法

第六節 酶的分離純化套用實例

一、青蟹鹼性磷酸酶

二、南美白對蝦N一乙醯J3一D一氨基葡萄糖苷酶

第三章 酶的理化性質研究

第一節 酶亞基數及分子量的測定

一、酶蛋白亞基數及亞基分子量的測定原理與方法

二、酶蛋白總分子量的測定原理與方法

第二節 酶的等電點測定

一、等電點測定的原理

二、等電聚焦電泳技術

第三節 酶的胺基酸組成

一、胺基酸組成分析

二、特殊胺基酸含量的測定

三、醯胺含量的測定

第四節 糖基酶中糖的組成與連線方式的研究

一、糖蛋白的分析

二、糖蛋白中糖成分的分析

三、糖基連線方式的研究

第五節 幾種海洋動物酶的理化性質的研究實例

一、鋸緣青蟹鹼性磷酸酶的理化性質研究

二、南美白對蝦N一乙醯一J3一D一氨基葡萄糖苷酶的理化性質研究

第四章 酶催化的動力學性質研究

第一節 酶促反應的基本動力學

一、Michaelis—Menten方程的建立

二、Briggs—Haldane修正的Michaelis—Menten方程

三、關於Michaelis一Menten方程的討論

四、米氏常數Km的意義

五、米氏常數Km和最大反應速度Vm的圖解法測定

六、米氏方程的積分形式

第二節 King—Altman方法推導速度方程

一、用穩態法推導動力學方程的基本步驟

二、King—Altman圖像法推導動力學方程

三、wang和Hanes結構法則

第三節 酶濃度對反應速度的影響

第四節 產物濃度對酶促反應的影響

一、產物對酶初速度的影響的動力學

二、可逆反應的Haldane關係式

第五節 高底物濃度對酶活力的影響

一、動力學模型建立

二、動力學方程的推導

第五章 酶的抑制劑

第一節 酶抑制劑的類型

一、酶抑制劑兩大類型

二、區別可逆抑制劑與不可逆抑制劑的實驗設計與操作

第二節 不可逆的抑制劑

一、非專一性的不可逆抑制劑

二、專一性不可逆抑制劑

第三節 可逆抑制劑作用的動力學

一、競爭性抑制作用的動力學

二、非競爭性抑制作用的動力學

三、反競爭性抑制作用的動力學

四、混合型抑制作用的動力學

第六章 pH對酶活力的影響

第一節 pH對酶催化的效應

一、酶促反應的最適pH

二、酶的pH穩定性

第二節 pH對酶可逆作用的動力學

一、酶活性中心可解離基團的解離常數

二、pH影響酶活性中心解離基團的動力學模型的建立

三、酶活性中心解離基團的解離常數的測定

第三節 有機溶劑對酶活性中心解離基團的微擾作用

第四節 pH對酶效應研究的實例

一、pH對青蟹鹼性磷酸酶(ALPase)催化pNPP水解反應的效應

二、酶活性中心解離基團解離常數的測定

第七章 溫度對酶活力的影響

第一節 溫度對酶催化反應的影響

一、酶促反應的最適溫度

二、酶的熱穩定性

第二節 溫度對酶催化反應速度常數的影響

一、溫度與速度常數

二、酶促反應的熱力學參數的測定

第三節 溫度對酶催化反應速度常數的影響

一、酶活性中心解離基團的標準熱焓

二、酶促反應的熱力學常數測定實例

三、酶活性中心解離基團的解離熱焓測定實例

第四節 酶的熱失活動力學

一、經典的酶熱失活研究方法

二、酶失活過程中的底物反應動力學方法

三、酶的熱失活表觀速度常數的測定

四、酶熱失活的微觀速度常數的測定

第八章 酶的多底物動力學

第一節 術語

一、多底物催化反應歷程的Cleland表示法

二、多底物反應的酶中間物

三、多底物反應歷程的分類

四、多底物反應的動力學參數表示法

五、多底物反應機理的圖形表示法

第二節 OrderedBiBi機理

一、反應模型的Clleland表示法

二、動力學方程的推導(King—Altman推導法)

三、反應速度方程用動力學常數表示的基本方法

四、作圖法求解動力學參數

第三節 RandomBiBi機理

第四節 PingPongBiBi機理

第五節 多底物反應機理的判斷

第六節 產物的抑制作用機理的判斷

一、有序雙雙反應(OrderedBiBi)的產物抑制作用的判斷

二、桌球雙雙反應(PingPongBiBi)的產物抑制作用的判斷

三、Cleland的產物抑制作用的判斷規則

第九章 酶功能基團的化學修飾

第一節 化學修飾的原理

一、影響酶的功能基團反應活性的主要因素

二、修飾劑反應性的決定因素

第二節 採用非特異性試劑對酶功能基團進行修飾

一、特殊胺基酸殘基的化學修飾

二、修飾劑和修飾反應條件的選擇

第三節 親和標記和差示標記

一、親和標記法的原理

二、差示標記法的原理

第四節 酶活性中心必需基團數的測定

一、酶修飾失活動力學

二、酶修飾失活速度常數比較法判斷必需基團數(Ray—Koshland方法)

三、鄒氏圖解法求必需基團數

第十章 酶的分子結構基礎及催化作用機理

第十一章 酶抑制劑的設計與套用

第十二章 酶分子構象的研究技術

第十三章 多酶體系及調節酶

第十四章 酶活性調控

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