Lambert-Beer定律是吸收光度法的基本定律，表示物質對某一單色光吸收的強弱與吸光物質濃度和厚度間的關係。
1．Lambert-Beer定律的推導
⑴Lambert-Beer定律的數學表達式
I0：入射光強（平行單色光）；I：透射光強
S：吸光物質截面積；l：吸光物質厚度
n：吸光質點（原子、離子或分子）數
dS = kdndS/S =（kdn）/S
（負號表示光強因被吸收而減弱）
∵ S = V（體積）/ l（厚度），n = V·C（濃度） ∴ n / S = l·C
Lambert-Beer定律的數學表達式：-lg(I/I0)= ECl
[概念]
透光率(transmitance，T)：T = I/I0
吸光度(absorbance，A)：A = -lg T =-lg(I/I0)= ECl （A與C成正比關係）
T = 10-A = 10-ElC（T與C成指數函式關係） ⑵Lambert-Beer定律的物理意義及成立條件
Lambert-Beer定律：當一束平行單色光通過均勻的非散射樣品時，樣品對光的吸光度與樣品的濃度及厚度成正比，A = ECl。
2．吸光係數(absorptivity)
[引入] Lambert-Beer定律：A = ECl中E為比例常數，稱為吸光係數。
⑴吸光係數的物理意義：吸光物質在單位濃度、單位厚度時的吸光度。是定性和定量的依據。
⑵吸光係數的兩種表示方法：
摩爾吸光係數（ε或EM）：在一定波長時，濃度為1mol/L、厚度為1cm時的吸光度。多用於分子結構研究。
百分吸光係數（比吸光係數，）：在一定波長時，濃度為1%（W/V）、厚度為1cm時的吸光度。多用於含量測定。
