負染色法

負染色法 英文名：negative staining 是一種易於在電子顯微鏡下觀察試樣的微細結構的方法。，又稱“襯托染色法”。

負染色法 negative staining的染色處理過程主要並非針對菌體本身，故又稱“襯托染色法”。是一種易於在電子顯微鏡下觀察試樣的微細結構的方法。它是用磷鎢酸鈉、醋酸氧鈾等電子密度高的物質，嵌入生物試樣的間隙，根據產生的對比進行觀察，而非原來意義上的物質染色。它與通常在電子顯微鏡中所得的陽面物像不同，而是陰面物像，因而有此名稱。解像力可達0.5微米以下。
最早由S.Brenner和R.Horne，（1959）用於病毒粒子的觀察，以後利用此法很快地積累了病毒、細菌以及分層蛋白質的微細結構等方面的知識。
負染色法需要使用酸性染料來染色，如伊紅或苯胺黑。因為細菌體表面帶負電，而酸性染料的色原也帶負電，所以色原只能將背景染色。沒有染色的細胞在染色背景下就能很容易的觀察到。在負染色法中，標本不需要熱固定，細胞不會因為化學藥物的影響而變形，對於不易染色的細菌或病毒也能觀察。
負染色法 此種染色法之染色處理過程主要並非針對菌體本身，故又稱「間接染色法」。 所用之染劑系因陰離子呈色，所以無法對同樣帶陰電荷之菌體細胞呈色，而於染色處理時會在細胞周圍形成沉澱，這種情形即稱為陰性或間接染色。
又稱背景染色法
原理：
背景染色需用酸性染料如伊紅或苯胺黑。因細菌體錶帶負電荷，而酸性染料之呈色原（ chromogen ）也帶負電荷，故不能滲入細胞內。 背景染色之實際套用有二，一為標本不需以熱固定，細胞不至因化學藥物之影響而變形，可觀其自然之大小與型態，二乃可藉以觀察不易染色之細菌如螺鏇菌。
材料：
試劑
苯胺黑染色液
器材
酒精燈（或本生燈）、接種環、染色盤、玻片、拭鏡紙及顯微鏡。
步驟：
取一小滴苯胺黑染色液，滴於潔淨玻片之一端。
以無菌操作取一接種環之培養，置入苯胺黑染色液中，混勻。
取另一玻片（或蓋玻片）其一端置於苯胺黑色液之前，並呈 30 度狀態，向他端推去，使混和液成一薄塗膜。
將玻片置空氣中乾燥，不宜以熱固定。
以油鏡觀察之。