臨床意義
血膽固醇——動脈硬化、心腦血管疾病
血清總膽固醇水平增高是導致冠心病的獨立危險因素。血清總膽固醇越高,發生動脈粥樣硬化的風險越大,時間也越早,是心血管疾病的最重要指標之一。
血甘油三酯——冠心病、腦缺血
甘油三酯高的後果是血液中脂質含量過高導致血液粘稠,在血管壁上沉積,漸漸形成小斑塊狀動脈粥樣硬化,這是最直接的危害,進而導致心腦血管疾病。此外,甘油三酯高的危害還包括引發高血壓、膽結石、胰腺炎;還能夠加重肝炎、致使男性性功能障礙、導致老年痴呆等。
血高密度膽固醇HDL(好膽固醇)——心肌缺血梗塞
HDL(好膽固醇)主要作用是肝外組織中過多的膽固醇轉運到肝臟代謝,以防膽固醇在這些組織中過多的聚集。現代研究證實,高密度膽固醇具有防止動脈粥樣硬化、降低冠心病死亡率的作用。
血低密度膽固醇LDL(壞膽固醇)——心肌缺血梗塞
LDL(壞膽固醇)較粘稠,流動率慢,而且它由肝臟到器官細胞時,會沿路累積粘在血管壁,是致動脈硬化的罪魁禍首。
檢查對象
目前國內外專家建議下列成年人最需要進行血脂檢查:
1.已知某項血脂異常必須定期(如每月)進行血脂檢測
2.做過心腦血管支架或搭橋的患者,必須嚴格定期檢測各項血脂,控制血脂水平。
3.已有冠心病、腦血管病或周圍動脈粥樣硬化病者;
4.有高血壓、糖尿病、肥胖、吸菸者;
5.有冠心病或動脈粥樣硬化家族史者,尤其是直系親屬中有早發病或早病死者;
6.有黃瘤或黃疣者;
7.有家族性高脂血症者;
8.40歲以上男性及絕經期後女性。
兒童的血脂異常也應引起重視。研究發現,冠心病、動脈粥樣硬化和高血壓都起始於兒童或青少年時期,嚴重者伴有靶器官病理改變。冠心病的部分危險因素在兒童期即可存在並且加劇兒童動脈粥樣硬化發展的病理過程。此外,因肥胖所致的繼發性高脂血症也是一個日趨嚴重的、全球關注的公共衛生問題。
美國把有冠心病高危因素的2歲兒童也作為血脂檢查對象:包括父母或祖父母在55歲前經冠脈造影診斷冠心病,包括曾經皮冠狀動脈成形術,冠狀動脈搭橋術或經確診的心肌梗死、心絞痛、外周血管疾病、中風或猝死;父母有高脂血症。
類型
普通型
此類血脂儀只能測量血脂中某單一的指標,如一台血脂儀只能測量血液中膽固醇的含量,對患者的某一方面的疾病有一定的參考作用。這類血脂儀價格也相對低廉,一般在幾百塊錢就可以買到。
專業型
此類血脂儀在普通型的基礎上增加了幾種血脂的檢測功能,可以檢測血液三項(膽固醇、甘油三酯、高密度膽固醇)和血糖值。使用不同的測試條在同一款血脂儀上檢測,得到相應的結果。這類產品價格在1500左右。
豪華型
與前兩種血脂儀相比,此血脂儀的功能更齊全,它不僅可以測血液中血脂多種指標,還可以測量尿液多項指標。使用不同的血液測試條可以測出血膽固醇、甘油三酯、血高密度膽固醇和血糖值。使用尿液測試條通過儀器可以測出尿蛋白、尿潛血等十一項指標。這些指標還可以作為醫生診斷病人的依據。此外,這類產品還具有數據傳輸的功能,可以連線電腦、智慧型手機等移動設備,實時掌控各項指標浮動狀況。這種血脂儀相對價格也較貴,約2000-4000元。
檢測原理
血脂包括多種指標,測定方法也因不同的指標而不同,最基本的包括總膽固醇、甘油三酯和血高密度膽固醇(HDL)
l、總膽固醇(TC)
酶法(COD-PAP法)
原理:血清中的膽固醇約1/3為游離膽固醇,2/3為與脂肪酸結合的膽固醇酯。膽固醇酯被膽固醇酯水解酶(CEH)水解成游離膽固醇,後者被膽固醇氧化酶(COD)氧化成膽甾烯酮並產生過氧化氫,再經過氧化物酶催化,使4-氨基安替比林與酚(三者合稱PAP)反應,生成紅色醌亞胺色素(Trinder反應)。醌亞胺的最大光吸收在500nm左右,吸光度與標本中TC含量成正比。
正己烷抽提L-B反應顯色法
原理:用氫氧化鉀乙醇液使血清蛋白變性,並使膽固醇酯水解為膽固醇。加水後用正己烷分溶抽提,可從鹼性乙醇中定量地提取膽固醇(達99.7%)。提取的膽固醇溶液中除少量其它固醇(人血清中約含膽固醇的1%)以外,基本上不含干擾物。故測定結果與同位素稀釋-氣相色譜質譜法(決定性方法)接近。
2、甘油三酯
酶法(COD-PAP法)
原理:用脂蛋白酯酶(LPL)使血清中三醯甘油(TG)水溶解成甘油與脂肪酸,將生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化。以磷酸甘油氧化酶(GOP)氧化3-磷酸甘油(G-3-P),然後以過氧化物酶(POD),4-氨基安替比林(4-APP)與4-氯酚(三者合稱PAP)反應顯色,測定所生成的H2O2,故本法簡稱為CPO-PAP法。
變色酸顯色法(CDC參考方法)
原理:用二氯甲烷提取血清TG,同時加入矽酸去除磷脂、游離甘油、甘油一酯、部分甘油二酯及蛋白。TG經氫氧化鉀皂化生成甘油,酸化後以過碘酸氧化甘油產生甲醛,用亞砷酸還原過剩的過碘酸後,甲醛與變色酸在硫酸溶液中加熱產生紫紅色反應,然後比色測定。
3、血高密度膽固醇(HDL)
勻相測定法
基本原理有以下幾類:PEG修飾酶法(PEG法)、選擇性抑制法(SPD法)、抗體法(AB法)、過氧化氫酶法(CAT法)
超速離心結合選擇性沉澱法
美國CDC採用本法測定參考血清的靶值,並用於評價常規方法的準確性,被認為是目前測定HDL-C最準確的方法。此法分三步:超速離心—選擇性沉澱—HDL-C測定。
硫酸葡聚糖-Mg沉澱法
原理:以硫酸葡聚糖DS50(MW50000±5000)與鎂離子沉澱血清中含apoB的脂蛋白[LDL,VLDL,Lp(a)],測定上清液中的HDL-C。[2]
4、血低密度膽固醇(LDL)
勻相測定法
基本原理有以下幾類:增溶法(Sol法)、表面活性劑法(SUR法)、保護法(PRO法)
β -定量法
本法為超離心結合選擇性沉澱法。超離心、選擇性沉澱二步驟與HDL-C參考方法相同,只是,Chol測定時除測定沉澱後上層的HDL-C外,還同時測定超離心後的下層液(含HDL和LDL)膽固醇。
PVS沉澱法
原理:血清中聚乙烯硫酸鹽-聚乙二醇甲醚(PVS)選擇性地沉澱LDL,離心後上層液中含HDL,VLDL和CM,用膽固醇測定酶試劑分別測定上層液和血清總膽固醇含量,二者之差即LDL-C含量。
Friedawald公式計算法
Friedawald原公式按舊單位mg/dl計算,假設血清中VLDL-C為血清TG量的1/5量計(以重量計)則:LDL-C=TC-HDL-C-TG/5。按法定計量單位mmol/L計算,則應為LDL-C= TC-HDL-C-TG/2.2。
參考範圍
人群的血脂水平主要取決於生活因素,特別是飲食和營養,所以各地區調查所得參考值高低不一。我國《血脂異常防治建議》提出的標準(1997,6)為:
總膽固醇(TC)
理想範圍:5.20mmol/L(200mg/dl)以下
邊緣升高:5.23—5.69mmol/L(20l—2l9mg/dl)
升 高:5.72mmol/L(220mg/dl)以上
甘油三酯(TG)
理想範圍:l.70mmol/L(l50mg/dl)以下
升 高:l.70mmol/L(l50mg/dl)以上
高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)
理想範圍:l.04mmol/L(40mg/dl)以上
減低:0.9lmmol/L(35mg/dl)以下
低密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)
理想範圍:3.12mmol/L(120mg/dl)以下
邊緣升高:3.15—3.61mmol/L(121—139mg/dl)
升 高:3.64mmol/L(140mg/dl)以上
美國膽固醇教育計畫(NCEP),成人治療組(Adult TreatmentPannel:簡稱ATP*)l994年提出的醫學決定水平:
膽固醇(TC)
理想範圍:<5.lmmol/L(<200mg/dl)
邊緣升高:5.2—6.2mmol/L(200—239mg/dl)
升 高:≥6.2lmmol/L(240mg/dl)以上
註:ATP是NCEP承認治療組l994年提出的第一次報告。
甘油三酯(TG)
NCEP成人治療組第三次報告(ATPIII)提出的醫學決定水平:
理想範圍:<l.70mmol/L(<150mg/dl)
邊緣增高:1.70-2.25mmol/L(150-199mg/dl)
增 高:2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)
很 高:≥5.56mmol/L(≥500mg/dl)
高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)
<1.03mmol/L(40mg/dl)為降低,CHD危險增高
≥1.55 mmol/L(60mg/dl)為負危險因素。
ATPIII將HDL-C從原來的<35mg/dl(0.9mmol/L)提高到<40mg/dl(1.03mmol/L)是為了讓更多的人得到預防性治療(男性將從原來的15%提高到約40%,女性從原來的5%提高到15%的人群被規劃為高危人群)。
低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)
NCEP,ATPIII提出的醫學決定水平:
理想水平:<2.58mmol/L(<100mg/dl)
接近理想:2.58-3.33mmol/L(100-129mg/dl)
邊緣增高:3.64-4.11mmol/L(130-159mg/dl)
增 高:4.13-4.88mmol/L(160-189mg/dl)
很 高:≥4.91mmol/L(≥190mg/dl)
原因與對策
測試條過期
購買時、使用前均應注意檢查測試條包裝盒上的有效期,不要使用過期的試紙條,以免影響檢測結果。
測試條保存不當
不少檢測誤差是由測試條的變質引起的。血脂儀本身出現故障的機率較小,但測試條會受到測試環境的溫度、濕度、化學物質等的影響,因此測試條的保存很重要。要避免潮濕,放在乾燥、陰涼、避光的地方,用後密閉保存;應將測試條儲存在原裝盒內,不要在其它容器中盛放。手指等不要觸摸測試條的測試區。
儀器保存不當
血脂儀包裝後應儲存在0℃-40℃範圍內,相對濕度不超過90%,大氣壓力960hpa-l060hpa 並無腐蝕氣體和通風良好的室內。貯存期一般以不超過12個月為妥。
操作方法不正確
操作不當會導致檢測失敗或測定值不準確。各種血脂儀的操作程式大同小異,患者檢測時一定要先詳細閱讀使用說明,正確掌握血脂儀的操作方法。常見的不正確操作有:測試時測試條沒有完全插到測試孔的底部;檢測時試紙條發生移動等情況也會影響檢測結果,因此應將血脂儀放在平穩、安全之處使用。
採血方法不當
1、試時採血量不足,會導致檢測失敗或測得的結果偏低,需更換試紙條重新測定。如果血滴過大,溢出測定區,也會影響測定結果。2、市場上大部分血脂儀不可多部位採血,所以應根據說明書操作,一般采手指末梢血。
血脂儀不清潔
測試血脂時,常會受到環境中灰塵、纖維、雜物等污染,特別是檢測時不小心使血液污染了儀器的測試區,都會影響測試結果。因此血脂儀要定期檢查、清潔、校準。對測試區的清潔一定要小心,擦拭時不要使用酒精或其它有機溶劑,以免損壞儀器,可使用棉簽或軟布蘸清水擦拭。
長時間未校準血脂儀
儀器使用必須插入相應的測試條配套memochip(測試條數據存儲晶片),沒有插入memochip則無法進行檢測,插入非配套的memochip則會導致測試結果不準確。
電池電力不足
血脂儀使用一段時間後,如果測試時顯示屏上顯示“低電量”字樣或符號,考慮為電池電量不足,應及時更換新電池。
其他影響因素
例如運輸過程不當,摔扔儀器等行為。
關鍵技術
穩定性(CV值,變異係數):穩定性是評價血脂儀好壞的重要指標。
由於血脂儀相對誤差較大,血脂儀的穩定非常重要,測值穩定的血脂儀說明試紙酶的穩定性好。所以培養酶技術越先進的廠家產品穩定性越好。
準確性(SD值,標準偏差、相關係數):只要試紙穩定性好,就可以通過調節密碼來使測值儘量接近標準值,也就是所謂的定標,準確性的前提是穩定性,沒有穩定性就根本談不上準確性,各廠家的定標標準及技術會有差異,準確性好的產品代表廠家定標技術好。
批間差:由於測試條的生產過程對環境要求及其嚴格,生產廠家會通過定標讓測值儘可能與標準值接近,但不同批次的測試條之間的差異肯定要比同批次測試條之間的差異要大一些,這就是批間差;也就是通常同批次測試條的穩定性要優於不同批次之間的穩定性,我們的國家標準對批間差的要求是不大於15%。
適用溫度:由於酶會受溫度影響,所以只有在一定的溫度條件下才可測量血脂,各廠家溫度補償技術高低除能決定高低溫穩定性外,還會決定血脂儀的適用溫度寬度,各家血脂儀的使用溫度稍有不同,一般在15-30度。
常見技術
用血量:指測量血脂所用的血量,一般在15微升左右,用血多少會影響病人的痛感,另外血也是很珍貴的。但是血量是保證檢測準確的重要因素。
測量時間:從發生反應到得出結果所用的時間,一般在1min之間,測量快慢會影響檢測的效率。
測量方法:膽固醇氧化酶法,磷酸甘油氧化酶法, 磷鎢酸-鎂沉澱法
測量範圍:膽固醇2.59-10.3mmol/L,甘油三酯:0.57-5.65 mmol/L
血高密度膽固醇:0.65-2.20 mmol/L。
試紙包裝:未開封的測試條應持續儲存於含有乾燥劑的密封塑膠瓶內,有效期為一年;開封后的血脂測試條應持續儲存於含有乾燥劑的密封塑膠瓶內,有效期為180 天。生產批號、生產日期見包裝。切勿使用超過有效期限或試紙塊已變色的測試條。
取血方式:使用專業採血筆可一次性採集需要的血液容量。
操作方法
血脂儀的操作基本上分五個步驟:
第一步:打開電源,直接按電源開關start
第二步:顯示請插入校準卡。插入memochip校準卡,螢幕會顯示校準卡相應的檢測項目名稱和測試條生產批號。
第三步:顯示插入測試條,正面朝上插入測試條進樣槽(位於儀器上部)
第四步:顯示放置樣本。準備血液樣本,用加樣器吸取15ul的血液樣本一次性滴於“測試條加樣區”孔內
第五步:顯示測試中,約1-2分鐘顯示測試結果。
第六步:檢測結束。完成檢測並自動儲存好檢測結果,如不檢測其它項目,可直接關機,如仍需檢測其他項目或重複檢測該項目,請繼續操作。
第七步:顯示樣本檢測。當完成一個檢測項目後,按3個鍵中任意鍵,關閉結果顯示界面,進入到樣本檢測界面,按start鍵,顯示插入校準卡,重複第二步到第六步的操作即可。
保存
1. 將測試條持續儲存於含有不小於5 克乾燥劑的密封塑膠瓶內。
2. 測試條應在20℃—30℃乾燥陰涼處儲存;也可存放在冰櫃內(2℃—8℃),但必須保證在使用前恢復到室溫。不能使之結冰。
3. 遠離熱源和避免直接陽光照射。
4. 不要丟棄小瓶中的乾燥劑。
5. 每次使用時,取出一個測試條後應迅速的將瓶蓋蓋緊。
6. 取出的測試條應儘快使用。
7. 將memochip存放於分析儀中或與原始測試條存放在一起。
8. 將測試條存放於原包裝內,不要跟別的批號測試條混合存放,也不要和別的批號memochip存放在一起。
9. 測試條一直保存在含有乾燥劑的密封瓶中在有效期內是穩定的。
10. 在有效期內保存使用。未開封的血總膽固醇分析測試條應持續儲存於含有乾燥劑的密封塑膠瓶內,有效期為一年;開封后的血總膽固醇分析測試條應持續儲存於含有乾燥劑的密封塑膠瓶內,有效期為180 天。生產批號、生產日期見包裝。切勿使用超過有效期限或試
紙塊已變色的測試條。
區別
醫院的生化儀測試靜脈血有較嚴格的程式和質量控制標準,相對準確。指血是末梢血,取材比較方便,創傷也小,但是血細胞有時會被擠壓變形,血液成份的濃度會被組織液稀釋等等。對化驗結果的準確性有些微影響。靜脈血與上面比較正好相反,所以醫院裡化驗多用靜脈血。血脂儀用指血就能方便測定血脂狀況,還可以作為醫生診斷的標準。
檢測注意事項
1、儘量在室溫下;
2、避免將儀器置於電磁場(如行動電話、微波爐等)附近;
3、採血量不能過多或過少
4、注意血脂測試要使用專業配套的測試條
使用注意事項
l、血脂儀可用於血脂多項指標的檢測
2、請勿放置於陽光直射或高溫潮濕的場所,請勿將機器掉至地面並避免碰撞,請勿自行拆卸或修理
3、操作時可能接觸傳染性物質,使用儀器時需使用防護手套或其他防護措施。
4、血脂儀必須配合使用同一品牌的試紙,不能混用。請勿分裝試紙條,並在有效期限內使用。
5、儀器必須使用測試條配套的memochip(測試條存儲器晶片),沒有插入memochip則無法進行測試。插入非配套的memochip則會導致結果不準確。
6、保持儀器清潔才能保證維持良好的運行。
7、如果長時間不使用,請用防塵罩蓋在儀器上,不要任意拆卸儀器。
8、因廢棄物中可能含有對人體有害的物質,所以對儀器所使用的試劑廢棄物應按照試劑使用要求處理。
採血應需注意
取血點如果選在手指正中是比較痛的。一般建議取血點在手指偏側面,這裡的神經分布較手指正中少,痛感較輕。但也不要太接近指甲邊緣,這樣不易消毒,不好擠血。取血點可在十個手指輪換選取,多數人選取除大拇指外的其餘八指。取血前可用溫水洗手,垂手臂,可使手指血管充盈,容易採血。採血筆刺破手指後,應從指跟向指端(採血點)方向輕用力擠血,不要用大力擠血,否則擠出的血漿,組織液占了較大比例,影響準確性。如果擠不出血或血量較少怎么辦?可能與下列原因有關:①末梢(手指)循環差,可採取溫水洗手、垂手臂等。②採血的深度不夠,採血筆有不同的刻度,要了解自己採血時適合哪個刻度然後再“下手”。③擠血的技巧沒掌握。除了上述的“輕用力”外,擠血的用力處應在取血點至少12.5px以上,擠血時可以看到出血點處的皮膚充血。如果距離出血點太近的地方用力擠血,血管都被“壓扁”了,怎么能擠出血來呢?
保養和清潔
血脂儀要放置在乾燥清潔處,正常室溫下存放即可,避免摔打、沾水,勿讓小孩、寵物觸及、玩耍。血脂儀允許工作的溫度是10~40攝氏度,濕度是20%~80%,太冷、太熱、過濕均會影響其準確性。測試血脂時,不可避免會受到環境中灰塵、纖維、雜物等的污染,特別是檢測時不小心塗抹在其上的血液,都會影響測試結果,因此要定期清潔和保養機器,清除血漬、布屑、灰塵。清潔時,套用軟布蘸清水擦拭,不要用清潔劑清洗或將水滲入血脂儀內,更不要將血脂儀浸入水中或用水沖洗,以免損壞。對測試區的清潔一定要注意,擦拭時不要使用酒精等有機溶劑,以免損傷其光學部分。應注意將試紙條保存在乾燥陰涼的地方,每次使用時不要觸碰試紙條的測試區,並注意其有效期。