概述
山梨醇脫氫酶(Sorbitol dehydrogenase,SDH)又稱艾杜醇脫氫酶(Iditol dehydro-genase,ID),能可逆地催化D-山梨醇氧化為D-果糖。人體內此酶主要分布於肝臟,腎、腦、心、脾等組織中含量極少,血清中此酶活力很低,如酶活力升高,強烈提示肝損害。檢測血清SDH在反映肝損傷方面較ALT可能更具特異性。
英文名
Sorbitol Dehydrogenase
醫學檢查
分類
血液生化檢查、酶類測定
原理
在pH 10的甘氨酸/氫氧化鈉緩衝體系中,SDH催化下列反應:
D-山梨醇+NAD+→D-果糖+NADH+H+
通過監測340nm處NADH產生的速率,計算出SDH活性。
試劑
試劑A:100mmol/L NAD+溶液:4℃避光保存可穩定1周。
試劑B:用0.1mol/L甘氨酸/氫氧化鈉緩衝液(pH 10)配製成20mmol/L D-山梨醇基質液,其中含氯化鋅2.0mmol/L。
操作方法
試劑A 5μl與血清50μl混合,置37℃水浴5min,再加入1ml預溫至37℃的試劑B,迅速混勻並轉入37℃恆溫比色杯(10mm光徑)中,在340nm處監測。延遲時間60s後,每隔30s讀取1次吸光度,連續讀3min,求出平均每分鐘吸光度變化值(△A/min)。在上述條件下,每分鐘催化產生1μmol NADH的酶量,定義為1個酶活性單位。
附註:
(1)本法線性範圍為0~180U/L。批內和批間CV分別為3.9%和5.2%。
(2)反應試劑中加入2mmol/L鋅離子可使酶活性提高10%。
(3)甘氨酸緩衝液濃度為0.1mol/L,pH為9.5~10.0時SDH活力最高。
正常值
健康成人(n=60)血清:0~3.1U/L。
臨床意義
(1)正常人血清中SDH大多數測不出。
(2)急性肝炎時血清SDH活性明顯增高,據孫玉蓉等報導,在急性肝炎時,血清SDH陽性率為92.1%,這與Asada報告的陽性率(87%)基本相似。一般認為,SDH常在急性肝炎的黃疸前期或肝炎早期升高,發病1周后達到峰值,升高幅度大致與轉氨酶相平衡,恢復到正常範圍的時間較轉氨酶(ALT,AST)為早。因此,它對肝炎的早期診斷有很大的價值。
有作者報導急性肝炎血清中SDH活性最高可達15.5U/L(比色法),是參考值上限的6.2倍;而孫玉蓉等用動力學法可達93U/L,是此參考值上限的18.6倍,造成這一差別的原因可能是由於反應原理不同,前者反應方向是由山梨醇到果糖,反應pH是9.8;而後者採用的反應方向是由果糖到山梨醇,反應pH是7.4。
(3)在阻塞性黃疸及其他疾病,一般不升高,即使偶爾升高,也是因為並發肝實質損傷之故。因此它能較早期、敏感、特異地反映肝損傷情況,特別對肝細胞黃疸和阻塞性黃疸此酶活力可增高。
(4)慢性肝炎及肝硬化靜止期此酶活力在正常範圍,活動期則稍增加。癌腫轉移時,此酶活力可增高。
(5)內毒素休克導致低氧血症和肝臟缺血時,肝臟中央小葉細胞嚴重受損,此酶活性顯著升高。