培養方法
一、翻轉乾涸法
1、將組織剪成1mm3左右的組織塊
2、用PBS緩衝液清洗組織塊3次
3、將組織塊按照一定間距轉入培養瓶內
4、輕輕將培養瓶翻轉過來,將適量培養液加到非細胞生長面上,注意翻瓶時勿令組織小塊流動,塞好瓶塞置36.5℃溫箱培養2小時左右(勿超過4小時),使小塊微乾涸
5、從微箱中取出培養瓶,開塞,46度斜持培養瓶,箱瓶底腳部輕輕注入培養液少許,然後緩緩再把培養瓶翻轉過來,讓培養液慢慢覆蓋附於瓶地上的組織小塊置溫箱中靜止培養
6、待細胞從組織塊游出量增後,再補加培養液
二、薄層培養法
1、將組織剪成1mm3左右的組織塊
2、用PBS緩衝液清洗組織塊3次
3、將組織塊按照一定間距轉入培養瓶內4、靜置30分鐘(使組織塊更好的貼壁)
5、每瓶加入2.0mL新鮮培養液(緩慢,防止組織塊浮起),塞好瓶塞置37oC恆溫培養箱內培養
6、根據培養液的顏色變化,更換培養液(每天進行細胞形態觀測,細胞計數,測上清液PH值)